TargPurfy AF M1免疫亲和柱
黄曲霉毒素 M1 免疫亲和柱,适用于各类基质复杂样品(各种谷物、各类食品、各
种饲料)中黄曲霉毒素 M1 的靶向精准提取净化。
小柱中包含一种高效价、高纯度单克隆抗体,对黄曲霉毒素 M1 有特异性选择。
操作流程(按国标方法GB 5413.37-2010)
1、样品提取
1.1 液态乳、酸奶样品处理
※ 精密称取1g试样于具塞离心管中,加10mL甲醇,涡旋3min;
※ 置于4℃、6000r/min下离心10min或过玻璃纤维滤纸;
※ 上清液或滤液转移至烧杯中,加40mL水或PBS稀释;
※ 全部样品过免疫亲和柱净化。
1.2 乳粉、特殊膳食用食品 样品处理
※ 精密称取1g样品,加入4mL预热到50℃的纯净水,涡旋混匀至乳粉完全溶解;
※ 冷却至20℃后,加10mL甲醇,涡旋3min;
※ 置于4℃、6000r/min下离心10min或过玻璃纤维滤纸;
※ 上清液或滤液转移至烧杯中,,加40mL水或PBS稀释;
※ 全部样品过免疫亲和柱净化。
1.3 奶油 样品处理
※ 精密称取1g样品于离心管中,加入8mL石油醚,待奶油溶解;
※ 加入9mL水和11mL甲醇,振荡30min,将全部液体移至分液漏斗中;
※ 加入0.3g氯化钠充分摇动溶解,静置分层后,取下层溶液;
※ 旋转蒸发至10mL以下,用PBS缓冲液(PH=7.4)稀释至30mL,混匀;
※ 全部样品过免疫亲和柱净化。
PBS配置:
0.20g KH2PO4+2.92g Na2HPO4•12H2O+8.0g NaCl+0.20gKCl 蒸馏水900mL溶解后,用盐酸调节pH=7.4,
再加水定容至1000mL
2、过柱净化
※ 将50mL SPE空柱管通过SPE转接头连接于免疫亲和柱上端;
※ 处理好的样品液以1~2滴/秒的速度通过免疫亲和柱,弃掉流出的液体;
※ 用10mL水淋洗免疫亲和柱,弃去流出液;
※ 利用真空设备抽干免疫亲和柱1min;
※ 用乙腈(或甲醇)2mL×2淋洗免疫亲和柱和空柱管两次,收集全部洗脱液;
※ 在50℃氮气下吹至近干(约100-200μL),用初始流动相定容至1.0mL,涡旋
30s溶解残留物,0.22/0.45μm滤膜滤过,收集续滤液上机检测。