Cleanert® SLE 固相支持液液萃取产品,采用特殊工艺处理过的硅藻土,具有最大的比表面积和最低的表面活性,能够提供一个理想的液液分配的支撑表面,可以代替大部分传统的液液萃取方法。该方法可以应用于制药,药物代谢分析,生化分析,纺织业,
食品,环境等多个领域。通过装填在SPE-96 孔板及柱管中,更容易实现萃取的自动化。与传统的液液萃取相比,具有更高的萃取效率和回收率,生物体液的萃取体积可低至 100 μL,避免乳化现象,萃取时间缩短一半以上。
Cleanert® SLE 采用亲水处理,填料对水性样品吸收更快速,更完全,减少上样后的等待时间;不同颗粒度的设计满足不同基质需求,SLE 小颗粒填料层更均匀,适合处理少量的血浆等生物样品;而通用型产品颗粒度适合较复杂的基质样品,如食品及发酵液等。
通过控制填料的粒度,表面性质及酸碱度,博纳艾杰尔成为国内色谱级硅藻土原料的供应商之一,可以根据客户要求定制产品特性;目前已经发展的专用产品可以应用于纺织品中禁用偶氮染料前处理,食品中维生素D 检测,酱油中氯丙醇的检测,酒中的氨基甲酸乙酯的测定,血浆等生物样品中的药物检测,中药制剂中的有效组分的测定等。
操作步骤:
(1) 将样品加入到Cleanert® SLE 产品中等待5-10 分钟,样品将会充分渗透至硅藻土的多孔结构中并得以支撑。
(2) 加入上样量3 倍以上的洗脱溶剂洗脱小柱,洗脱溶剂与样品充分接触, 两相间进行微观的液液萃取。在重力条件下接收全部流出液。
(3) 加负压抽干柱体中存留的洗脱液并合并,过滤浓缩后用于重新定容分析。
* 注意事项:
该系列产品不需要提前预活化,否则会影响实验结果。
(1) 样品上样量上样体积不要超过最大上样量。洗脱液与上样量比例建议为3:1。
(2) 如出现粘稠样品无法在重力条件下上样情况,可以上样后短暂(5 秒)的加负压帮助上样液通过筛板,也可将样品用缓冲液稀释后上样,可使样品更易通过筛板。
(3) 碱性分析物建议使用1M 醋酸铵(pH 为9-10)作为缓冲液; 酸性分析物建议使用 1M 磷酸盐缓冲溶液(pH 为2~3)作为缓冲液。
(4) 甲基叔丁基醚,乙酸乙酯,二氯甲烷常被用于洗脱液;多次加入少量洗脱液的萃取效率优于一次性加入大量洗脱。
产品特点:
▲ 取代传统的液液萃取,对目标物质进行固相表面支撑的液液萃取。
▲ 只需要上样淋洗两步就可以完成萃取操作,避免了乳化现象的发生,省时省力。
▲ 结合固相萃取和液液萃取的特点,简单,高效,操作方便,节约溶剂和时间,易于实现自动化。
SLE 固液萃取与LLE 液液萃取除磷脂能力对比
LLE 液液萃取方法
●100 μL 血浆样品中加入100 μL 缓冲液稀释后加入1mL 乙酸乙酯萃取;
● 涡旋震荡5 分钟;
● 4000rpm 下离心10 分钟;
● 取有机层并在45℃下氮气吹干;
● 200 μL 甲醇重新定容,过滤后分析;
SLE 固液萃取方法
●100 μL 血浆样品加入100 μL 缓冲液稀释后上样到SLE 96 孔板(300mg/ 孔);
● 静置20 分钟;
● 每孔以1.5 mL 甲酸乙酯洗脱,加负压将洗脱液抽干2 分钟;
● 接收洗脱液并在 45℃下氮气吹干;
● 200 μL 甲醇重新定容,过滤后分析;
LC-MS/MS 条件
色谱柱:Venusil® MP C18 (2.1×150 mm, 5 μm);
流动相:ACN : 0.01mol/L 醋酸铵溶液 (0.1% 甲酸) = 90 : 10;
流 速:0.3 mL/min; 柱 温:25 ℃
结论:SLE 法净化后的样品杂质明显较LLE 法更少,杂质峰响应值低了100 倍左右;