东曹TSKgel Ether-5PW疏水色谱柱

疏水作用色谱法

在疏水作用色谱法（HIC）中，弱非极性固定相与高浓度的盐的水溶液同时使用。该方法主要通过减少盐的浓度来分离蛋白。 

在反相色谱中，蛋白通过与填料上烷基或芳基相互作用保留下来。

不同于反相色谱，在疏水反应色谱中上述官能团的密度较低，且蛋白分子只在一个或少数几个位置上吸附。 

盐浓度较高时会产生吸附作用，但若加入低百分比浓度的有机溶剂降低盐浓度，则会产生脱附作用。 

尽管二者均以疏水作用为基础，但HIC分离的选择性明显不同于反相LC。 

相对于RPC，HIC的容量较低，但其优势在于：流动相条件（主要是含水流动相）通常不会破坏高阶蛋白质结构。

TSKgel HIC 色谱柱

TSKgel HIC 色谱柱由三种从低到高不同疏水性的配体（丁基、醚和苯基）键合在聚甲基丙烯酸酯上的填料组成的。

醚柱与苯基柱所用的聚甲基丙烯酸酯基树脂是一种多孔材料，孔径大小为1000A，排阻限为1,000,000道尔顿，能提供高载量与高上样量。TSKgel Butyl-NPR 是无孔基质。在该基质上，只有颗粒表面能进行吸附。较短的运行时间和良好的回收率使丁基柱成为高通量或QC分析的优先选择。三种柱类型之间的比较请详见下图。

图 1. 常规HIC色谱柱和无孔HIC色谱柱的比较