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| 体积排阻色谱（SEC） |
体积排阻色谱（SEC）
精确测定生物分子聚集、断裂和化学配基/修饰
体积排阻色谱（SEC）是一项使用水相洗脱液基于尺寸分离蛋白质、寡核苷酸和其它复杂生物聚合
物的技术。
采用SEC 进行聚集体分析研究
蛋白质生物药物中存在的聚集体的尺寸、类型和数量，可能对药效和制剂产生影响——更坏情况下，
将引起免疫反应。聚集体的形成有各种机制，包括形成二硫键和发生非共价相互作用。
由于蛋白聚集体，包括二聚体的尺寸与蛋白质单体有很大区别，所以，我们可以用SEC 分离这些不
同形式的蛋白质。实际上，SEC 结合UV 或光散射检测是定量检测蛋白质聚集体的标准技术。
采用SEC 进行定量分析和分子量测定
对于蛋白质和其它离散分子量的分子，用SEC 可以对单体、二聚体、聚合体和片段进行检测和定量。
SEC 还可以分离寡核苷酸混合物。
对于各种尺寸的生物聚合物，如淀粉和其他多糖，SEC 可以提供分子量分布和支链（用适合的检测
器）方面的数据。
安捷伦作为有30 多年SEC 色谱柱和仪器生产经验的领先企业，正不断开发能够提供更高分离度和
更快分离速度的新的SEC 产品。本节将着重介绍用于蛋白质生物聚合物分析的各种安捷伦SEC 系列
色谱柱：
* 有各种孔径的Bio SEC-3 和Bio SEC-5 柱可供选择，非常适合蛋白质的分析——尤其适合测定药
用生物制品中的蛋白二聚体和聚集体。请注意，3 μm Bio SEC-3 柱与行业标准的5 μm Bio SEC-5 柱
相比，能提供更高的分离度
* ProSec 300S 柱在高盐条件下能很好地分离球蛋白
* ZORBAX GF-250 和GF-450 柱最适合蛋白质的制备型SEC 分离，因为其具有较大的柱尺寸和较
高的流速
* PL aquagel-OH 柱可用于分析宽分子量范围的生物聚合物，例如PEG、寡糖和多糖、淀粉和树脂
| 体积排阻色谱（SEC） | ||
| 应用 | 安捷伦色谱柱 | 说明 |
| 多肽、蛋白质 | 安捷伦 Bio SEC-3 色谱柱 | 3 μm 填料可选 100?、150? 和 300? 孔径，能够提供更高的分离度和更 快速的分离 |
| 生物大分子和含多种分子量组分 的样品 | 安捷伦 Bio SEC-5 色谱柱 | 有更多孔径可供选择（100?，150?，300?，500?，1000? 及 2000?）， 能够覆盖更宽的分析物范围 |
| 球蛋白、抗体 | ProSEC 300S 色谱柱 | 选择单柱进行高盐浓度下的蛋白质分析 |
| 蛋白质，球蛋白 | ZORBAX GF-250/450 色谱柱 | 适用于 SEC 半制备和制备的较大流速和较大规格的色谱柱 |
| 低分子量聚合物和低聚物、低聚 糖、 PEG、木质素磺酸盐 | 2 或 3 个 PL aquagel-OH 色谱柱 | PL aquagel-OH 分析型色谱柱的 pH 范围为 2-10，与有机溶剂（含量高达 50% 的甲醇）兼容，机械稳定性高达 140 bar（2030 psi）并具有低的 色谱柱操作压力 |
| ? PL aquagel-OH 8 μm ? PL aquagel-OH 20 5 μm ? PL aquagel-OH MIXED-M 8 μm | ||
| 多分散生物聚合物、多糖、纤维 素衍生物 | 2 或 3 个 PL aquagel-OH 色谱柱 | |
| ? PL aquagel-OH MIXED-H 8 μm ? PL aquagel-OH 60/50/40 8 μm | ||
| 极高分子量的聚合物、透明质酸、 淀粉、树脂 | PL aquagel-OH 60/50/40 15 μm 串联 | |
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