中药中主要物质含量分析检测方案

Apr.24，2015LC Application Lab， Shiseido ChinaNo.31， BDA International Business Park，2 Jing Yuan Street， BeijingEconomic Technological Development Zone，Beijing， China 100176Phone 010-6785-6801， FAX 010-6785-6882 丹参药材粉末的分析 丹参酮IIA 丹酚酸B 首先，按照2010版中国药典丹参酮IIA含量测定项下方法，对丹参药材粉末及丹参酮II对照品进行分析。 -样品 丹参酮II对照 Minutes 图1 SPOLAR 色谱柱分析色谱图 Minutes 图2 SPOLAR 色谱柱分析色谱图局部放大图 注：峰上标数字由下至上依次为理论塔板数与分离度。 HPLC Conditions ： 色谱柱：C 流动相： 水/甲醇=25/75 流1000 uL / min 温 检 25℃ PDA 270nm 进样量：55pL 样品： 对照：客户提供液标 样品：按2010版药典含量测定项下方法进行前处理(丹参酮II供试品溶液的制备) 接下来，按照2010版中国药典丹酚酸B含量测定项下方法，对丹参药材粉末及丹酚酸B对照品进行分析(由于对照品出现裂峰现象，怀疑已变质，因此未给出对照品分析结果，但对照品主峰与样品主峰的保留时间基本一致，不影响丹酚酸B峰的定位)。 图3 ACR色谱柱分析色谱图 图4 ACR色谱柱分析色谱图局部放大图 注：峰上标数字由下至上依次为理论塔板数与分离度。 HPLC Conditions： 色谱柱： CAPCELL PAK C18 ACR S5； 4.6 mm i.d.x250mm 流动相： 甲醇/乙腈/甲酸/水=30/10/1/59 流1000 uL/min 温 检 25℃ PDA 286nm 进样量： 10pL 样占： 按2010版药典含量测定项下方法进行前处理(丹酚酸B供试品溶液的制备) 分析结果与讨论 1.丹参酮II 本实验尝试使用 SPOLAR、MG、MGII、UG120 等四款 C18色谱柱，按照药典方法对客户提供的丹参药材粉末及丹参酮IIA对照品进行分析。其中， SPOLAR 色谱柱能得到最好分离效果，如图1、2所示，样品中丹参酮II峰与其峰前杂质能得到良好分离，分离度为2.15，理论塔板塔为13870；对照品丹参酮II峰理论塔板数也达到13228，均超过药典要求的2000， 完全符合药典要求。 2. 丹酚酸B 按照药典方法对客户提供的丹参药材粉末和丹酚酸B对照品进行分析，由于该流动相条件中含1%甲酸，酸性较强，因此我们使用了采用耐强酸色谱柱 CAPCELL PAK C18 ACR， 如图3、4所示，样品中丹酚酸B峰与其峰前后杂质均得到良好分离，分离度分别为2.84与2.06，理论塔板数为6519；因为丹酚酸B对照品出现裂峰，怀疑可能已经变质，所以未给出该结果，但其保留时间能与样品分析结果相对应，可定位丹酚酸B峰位置。样品中丹酚酸B峰理论塔板数超过药典要求的2000，该色谱柱能够符合药典要求。 ( 王志欣杨茜郭彦丽 )