细胞培养操作:
1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10 cm皿中,加入约8 mL培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,弃去消化液,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
c、按6-8 mL/瓶补加培养基,轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心4 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。
3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
细胞基本属性
商品介绍:
细胞名称:PC12未分化大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞 未分化
细胞别称:PC12未分化;大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞 未分化
种属来源:大鼠
年龄性别:雄性
组织来源:肾上腺嗜铬细胞瘤
生长特性:贴壁/悬浮
细胞形态:成团状悬浮、半贴壁;小的形状不规则细胞
背景简介:PC-12(未分化)细胞是来自能移植的雄性大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤。PC-12(未分化)细胞表达神经生长因子(NGF)受体,NGF可诱导产生神经表型。PC-12(未分化)细胞不合成肾上腺素。
生物安全等级:
细胞规格:1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测:无
基因表达情况:
保藏机构:中国科学院分子细胞科学卓越创新中心
培养基:1640+5%FBS+10%马血清+P/S
培养条件:气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
冻存条件:无血清冻存液,液氮储存
公司所有产品均不得用于人类或动物之临床诊断或治疗,仅可用于工业或科研等非医疗目的。
培养注意事项:
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象 发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由 客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度 变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。
4. 贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞,再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,,用新鲜的完全培养基重悬 细胞,并接种到新的培养瓶或培养皿中,置于培养箱中进行培养。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞 的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7. 该细胞仅供科研使用。
8. 备注:运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议 1:2 传代 。
9. 注意: 1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。
下列是公司正在出售的产品:
SNX27蛋白抗体 Anti-SNX27 | 甲酰甘氨酰胺核苷酸转移酶抗体 PFAS |
膜转运蛋白DISPA抗体 Dispatched | 基质金属蛋白酶-9抗体 MMP9 |
FITC标记人CD57单克隆抗体 human CD57/FITC | 小鼠干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)elisa检测试剂盒 |
乙基丙二酸脑病蛋白抗体 | 细胞钠离子(Na)浓度化学比色法定量检测试剂盒 |
血小板源性生长因子A抗体 PDGF-A | 慢性粒细胞白血病33抗体 FARSLA/CML33 |
丝裂原活化蛋白激酶2抗体 [KO验证抗体] ERK2 | 胎盘叶酸受体蛋白2抗体 FOLR2 |
ETHE1 | 大鼠β羟丁酸(βOHB)elisa检测试剂盒 |
(PROTEASE)比色法(440)定量检测试剂盒 | 位素法DNA斑点杂交试剂盒 |
小鼠胞外超氧化物歧化酶(SOD3)elisa检测试剂盒 | 即用型NZCYM液体培养基 5个/包 |
磷酸化细胞核因子p50/k基因结合核因子抗体 Anti-Phospho-NFKB1(Ser932) | 貂环磷酸腺苷(cAMP)elisa检测试剂盒免费代测 |
兔N端前脑钠素(NT-proBNP)elisa检测试剂盒免费代测 | Smad4抗体 Anti-Smad4 |
TUB蛋白抗体 Anti-TUB 1 | 嗅觉受体8H3抗体 OR8H3 |
PE标记小鼠CD20单克隆抗体 mouse CD20/PE | Cy5标记的兔抗小鼠IgG H&L-Fc |
Rab5激活蛋白6抗体 GAPex5 | FBF-1蛋白抗体 FBF-1 |
RAN GTPase酶激活蛋白1抗体 Anti-RanGAP1 | Rabbit Anti-Mouse IgG Fc / Cy5 |
FAM47E蛋白抗体 | PC12未分化大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞 未分化FAM47E |
MUTED蛋白抗体 | MUTED |
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