测序后纯化试剂盒 ( 磁珠法）

测序后纯化试剂盒 ( 磁珠法）

商品属性：

 产品介绍：

运输保存：常温运输，建议4℃保存。
PCR 后磁珠纯化方法及步骤 ：
1.96孔反应板从PCR仪下机后，放入黑色的96孔板架上，配平，在5810R离心机，使用水平转头， 4000转/分（4000rpm）离心一分钟。
2.从4℃冰箱中取出磁珠工作液，手动或振荡器充分震荡磁珠液，使其重新悬浮， 每孔加入磁珠液 5-10ul（建议使用5ul），再加入 70%乙醇 50ul，盖上胶垫，混匀后震荡5分钟。
3. 将96孔反应板放入96孔磁力板上放置3分钟，使磁珠完全吸附在孔底处或至溶液完全变清亮。
4. 带磁力板弃上清（切记：样品板不要离开磁方板），去掉胶垫，垫上吸水纸，在5810R离心机上倒离心60 秒（300 转/分）。
5. 每孔加入 70%酒精50ul，盖上胶垫，重新震荡悬浮，放入96孔磁力板上放置3分钟，使磁珠完全吸附在孔底处或至溶液完全变清亮。
6.带磁力板弃上清（切记：样品板不要离开磁方板），去掉胶垫，垫上吸水纸，在5810R离心机上倒离心60 秒（300 转/分）。
7.重复5、6步一次。
8.每孔加入30ul 的灭菌后的超纯水，盖上胶垫，震荡使磁珠重新悬浮。
9.在5810R离心机上正离心 10秒（300 转/分）将侧壁水珠离下即可。
10.将96孔反应板从磁力架上取下来，转移到测序仪跑板专用磁力架上，更换胶垫并扣紧。
11.上机跑板（切记：上在带有磁铁的底座上，以免损坏毛细管）。 

pcr相关试剂实验结果分析：

PCR实验结果的分析涉及多个方面，‌包括实验操作、‌试剂质量、‌实验条件等，‌这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。‌以下是对PCR实验结果分析的一些关键点：‌

循环次数过多：‌增加模板量减少循环次数，‌缩短退火时间及延伸时间，‌或改用两种温度的PCR循环，‌可以有效避免循环次数过多导致的问题。‌

退火温度过低：‌退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要，‌过低的退火温度可能导致非特异性扩增，‌影响结果的准确性1。‌

电泳体系问题：‌包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、‌凝胶没有凝固好、‌琼脂糖质量差等问题，‌这些都会影响DNA片段的分离效果。‌

试剂盒问题：‌运输储存不当可能引起试剂盒失效，‌试剂盒本身质量问题如引物选择、‌循环参数设置不当也可能导致实验失败1。‌

降解的陈旧模板：‌使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布，‌影响结果的解读1。‌

PCR假阴性结果：‌可能由引物长度不够、‌试剂浓度不标准、‌靶序列突变或缺失、‌循环参数设置错误、‌标本中有Taq酶抑制剂、‌PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。‌

为了获得准确的PCR实验结果，‌需要注意以下几点：‌

确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。‌

在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测，‌以便及时对反应条件进行调整。‌

防止样本的污染和交叉感染，‌以免影响PCR反应的准确性和可靠性。‌

通过上述分析，‌可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素，‌从而提高实验结果的准确性和可靠性。‌

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