Western一抗二抗去除液
商品属性:
货号 | 规格 | 产品名称 |
P-PR1345-100ml | 100ml | Western一抗二抗去除液 |
产品介绍:
Western 一抗二抗去除液,用于 Western Blot 中转移了蛋白的膜的重复利用。在 Western Blot 中完成了一抗二抗结合和后续的化学发光检测后,有时还需要检测 Actin、Tubulin 等内参蛋白或检测其它蛋白进行比较。Western 一抗二抗去除液可变性已经结合的抗体,使其失活,从而将同一张膜再用于其它抗体的杂交。与其它类型的一抗二抗去除液相比,该试剂不破坏抗原,处理过程中膜上抗原不丢失,因此可重复应用的次数更多、灵敏度更高。
特征
操作简单快速不会造成抗原蛋白的损失。
储存:室温可保存 2 年。
操作方法:
(1) 将杂交完毕的膜置入蒸馏水中,室温漂洗 5min。
(2) 漂洗结束后,弃去蒸馏水。
(3) 加入适量 Western 一抗二抗去除液(至少可覆盖膜表面),室温孵育 15min。
(4) 孵育结束后,弃去 Western 一抗二抗去除液。
(5) 加入适量蒸馏水,室温漂洗 5min×4 次;漂洗结束后弃去蒸馏水。注意:每次漂洗务必将废液倒干净。
(6) 然后进行封闭等后续操作,直至完成 Western Blot。
注意事项:
注意:该试剂为强烈的氧化剂,实验时务必做好防护工作。
如试剂接触到皮肤,请用大量的水冲洗,并尽快就医。
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pcr相关试剂实验结果分析:
PCR实验结果的分析涉及多个方面,包括实验操作、试剂质量、实验条件等,这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。以下是对PCR实验结果分析的一些关键点:
循环次数过多:增加模板量减少循环次数,缩短退火时间及延伸时间,或改用两种温度的PCR循环,可以有效避免循环次数过多导致的问题。
退火温度过低:退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要,过低的退火温度可能导致非特异性扩增,影响结果的准确性1。
电泳体系问题:包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、凝胶没有凝固好、琼脂糖质量差等问题,这些都会影响DNA片段的分离效果。
试剂盒问题:运输储存不当可能引起试剂盒失效,试剂盒本身质量问题如引物选择、循环参数设置不当也可能导致实验失败1。
降解的陈旧模板:使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布,影响结果的解读1。
PCR假阴性结果:可能由引物长度不够、试剂浓度不标准、靶序列突变或缺失、循环参数设置错误、标本中有Taq酶抑制剂、PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。
为了获得准确的PCR实验结果,需要注意以下几点:
确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。
在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测,以便及时对反应条件进行调整。
防止样本的污染和交叉感染,以免影响PCR反应的准确性和可靠性。
通过上述分析,可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素,从而提高实验结果的准确性和可靠性。
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