Fast Taq DNA Polymerase(快速扩增聚合酶)
商品属性:
货号 | 规格 | 产品名称 |
P-PR1087-500U | 500U | Fast Taq DNA Polymerase(快速扩增聚合酶) |
产品介绍:
储存条件:-20℃保存
制品说明:
Fast Taq DNA Polymerase 是经过基因改造的可以快速扩增的DNA聚和酶。Fast Taq DNA Polymerase具有5′→3′DNA聚合酶活性和5′→′外切核酸酶活性,无3′→5′外切酶活性。在PCR反应中,Fast Taq DNA Polymerase延伸速度为2 kb/20sec,产物3′端带A,可直接用于TA克隆。
活性单位:1单位(U)Fast Taq DNA Polymerase 活性定义为在74℃、30分钟内,以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板引物,将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。
质量控制:SDS-PAGE 检测纯度大于99%,经检测无外源核酸酶活性;PCR方法检测无宿主残余DNA,能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因;室温存放一周,无明显活性改变。
酶贮存缓冲液:
20mM Tris-HCl (pH8.0), 0.1 mM EDTA, 1mM DTT, 100 mM KCl, Stabilizers, 50% glycerol。
5×Fast Taq Buffer:
100 mM Tris-HCl (pH 8.4),100 mM KCl, 50 mM(NH4)2 SO4,7.5 mM MgCl2以及其他成分。
适用范围:
一般用于DNA片断的PCR扩增、DNA标记、引物延伸、序列测定、平末端加A 等,产物可以直接用于TA载体克隆。
pcr相关试剂实验结果分析:
PCR实验结果的分析涉及多个方面,包括实验操作、试剂质量、实验条件等,这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。以下是对PCR实验结果分析的一些关键点:
循环次数过多:增加模板量减少循环次数,缩短退火时间及延伸时间,或改用两种温度的PCR循环,可以有效避免循环次数过多导致的问题。
退火温度过低:退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要,过低的退火温度可能导致非特异性扩增,影响结果的准确性1。
电泳体系问题:包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、凝胶没有凝固好、琼脂糖质量差等问题,这些都会影响DNA片段的分离效果。
试剂盒问题:运输储存不当可能引起试剂盒失效,试剂盒本身质量问题如引物选择、循环参数设置不当也可能导致实验失败1。
降解的陈旧模板:使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布,影响结果的解读1。
PCR假阴性结果:可能由引物长度不够、试剂浓度不标准、靶序列突变或缺失、循环参数设置错误、标本中有Taq酶抑制剂、PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。
为了获得准确的PCR实验结果,需要注意以下几点:
确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。
在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测,以便及时对反应条件进行调整。
防止样本的污染和交叉感染,以免影响PCR反应的准确性和可靠性。
通过上述分析,可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素,从而提高实验结果的准确性和可靠性。
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