Western一抗二抗去除液,用于Western Blot 中转印了蛋白的膜的重复利用。在Western Blot中完成了一 抗二抗结合和后续的化学发光检测后,有时还需要检测 Actin、Tubulin 等内参蛋白或检测其它蛋白进行比较。通过使用Western一抗二抗去除液,充分去除一抗二抗,可以非常方便地重新利用使用过的膜检测其它蛋白,与重新跑SDS-PAGE胶相比,不仅省时省力,而且可以消除重新上样而带来的误差,使可比性更强。海基生产的Western一抗二抗去除液可变性已经结合的抗体,使其失活,从而将同一张膜再用于其它抗体的杂交。与其它类型的一抗二抗去除液相比,该试剂不破坏抗原,处理过程中膜上抗原不丢失,因此可重复应用的次数更多、灵敏度更高。 Western一抗二抗去除液原理图
主要特征
操作简单快速
对抗原蛋白作用温和,不会造成抗原蛋白的损失
转印膜至少可重复使用3~5次
应用
蛋白印记杂交膜(PVDF膜和NC膜)的再利用。
储存
4°C保存,有效期1年。
应用实例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果,可以看到检测反应<20min(达平台期)。
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应用实例2: 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略,在反应结束后,倒置反应管,溶解管盖上染料后,阳性样本呈现出醒目的绿色,阴性表现出橙色,区分明显。且该方法不受样本类型限制,杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。
![](https://img1.17img.cn/17img/images/202408/uepic/1ab7e4d0-ee4e-4ac0-a331-5e5047ebd645.jpg)
应用实例3:采用荧光酶活测定法在30℃和60℃条件下测定HotStart Bst 4.2,结果显示与未加入Aptamer的对照比较来看。HotStart Bst 4.2在30℃条件下酶活几乎无活性,而60℃条件下1min内酶活完全释放,恢复100%活性
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