EDTA脱钙液

产品概述

在组织切片过程中，一些组织内含有骨质或钙化灶时，含钙的组织不宜直接用石蜡包埋切片。这是因为钙和石蜡之间的密度不同，较难切出完整的切片。对含钙组织最hao固定之后，再进行脱钙或二者同时进行。然后进行下游操作如脱水、透明、浸蜡、包埋、切片。用于脱钙的试剂很多，脱钙剂包括有机酸、无机酸、乙二胺四乙酸(EDTA)以及电解法脱钙。 EDTA是一种相对较好的螯合脱钙剂，对组织结构影响最小，可以较好的保存组织的某些酶类，经EDTA脱钙后的组织可以进行免疫组化和原位杂交染色。但是该法脱钙速度太慢，一般脱需要数周至数月。EDTA脱钙液主要由EDTA、磷酸盐等组成， pH值为7.2。 其优点是： ① 经EDTA脱钙的组织染色结果好； ② 对组织的结构损害小。 其缺点是： ① 脱钙速度很慢，不适合常规标本脱钙使用； ② 脱钙后组织会稍微变硬； ③不宜用化学方法确定脱钙终点。可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。可以提供针对不同下游实验应用的试剂盒，例如用于Western Blotting和双向电泳等不同下游应用的试剂盒；含去垢剂成分和不含去污剂成分的蛋白提取试剂盒；专用于蛋白质谱检测、Pull-down实验的试剂盒等总计300多种蛋白提取试剂盒可供选择。还可以提供针对动物、植物等不同样本的细胞核、线粒体、溶酶体、叶绿体、外泌体等不同细胞器的提取试剂盒。

保存温度

室温保存

注意事项

1.开盖后组份按要求条件保存。

2.拆封后请尽快使用完！

有效期

一年

仪器准备

1.加热装置或微波炉振荡器

试剂准备

1.PBS缓冲液

2.蒸馏水

耗材准备

1. 离心管

2. 吸头

3. 一次性手套

使用注意事项

1.厚度5mm的骨组织脱钙时间一般脱钙10~30天即可，大多数在14～60天即可;

2.适当加温能加快脱钙的速度，一般不应超过37-40℃；

3.温度过高易导致骨组织松散解体，尤其不可高于60℃；

4.脱钙应彻底，防止脱钙不足或过度。脱钙程度应控制在不影响组织切片的同时尽量缩短脱钙时间，以免脱钙时间过长引起组织损伤；

5.脱钙用具尽量使用玻璃容器，避免金属容器；

6.骨组织脱钙应先固定，然后再脱钙或脱钙固定同时进行；不应脱钙后再固定，以减少对组织的损伤；

7.每隔一段时间检查下脱钙程度；脱钙过度会增加组织的损伤，影响染色结果。

使用方法

以下方法仅供参考，根据实际样本和参考文献情况进行调整。

1. 骨组织脱钙时，取材不易过厚，一般大约5mm。

2. 组织固定后，用PBS清洗3次，每次20min。

3. 组织用蒸馏水洗清洗3次，每次20min。

4. 组织转移至20~30倍体积的EDTA脱钙液中，脱钙10～30天或更长时间。如果想加快脱钙速度，可以置于37℃进行脱钙。如果必要，更换新的EDTA脱钙液继续脱钙，多数组织脱钙2周～3个月即可，每周更换一次直至终点。亦可采用微波快速脱钙法：微波炉设在200W左右的档位，每次加热5min，依据组织厚度和密度重复3～5min，中间间隔3～5min。

5. 用蒸馏水冲洗数次。

6. 常规脱水、包埋。

脱钙终点的测定（物理方法）：

采用针刺、手掐、钳夹等方法，当骨组织变软或针刺时没有阻力感即可终止脱钙。

物理检测会对组织结构有一定的损害，尽量避免用力过大或反复检测。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！