酒红指孢囊菌 百欧博伟生物 微生物菌种
酒红指孢囊菌,菌落紧密、坚韧、革状。基丝长,不规则分枝,直径0.5—0.7微米。通常无气丝,但在燕麦粉琼脂上有迹量皱形气丝。在水内活跃游动,孢子鞭毛染色未成。在葡糖天冬素琼脂和营养琼脂上有混圆小体。
一、菌种简介
平台编号:Bio-04607
提供形式:冻干物
拉丁属名:Dactylosporangium Vinaceum
中文译名:酒红指孢囊菌
拉丁学名:Dactylosporangium vinaceum
原始编号:JCM 3307
菌株来源:←JCM
保藏人:黄英
直接来源国家:日本
保藏时间:6/20/2006
其他保藏编号:=ATCC 35207 =BCRC 13327 =DSM 43823 =KCTC 9359 =NBRC 14181 =NCIMB 12891 =NRRL B-16297
生物危害:四类
模式菌株:模式菌株
菌株用途:模式菌株;Produces dactimycine
培养温度:28℃
培养基:0038
其他培养条件
分离源:土壤
采集国家:日本
用途:研究
注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用(产品信息以出库为准)
二、知识属性
蔗糖硝酸盐琼脂:基丝好,反面浅酒红色;有孢囊。可溶色素樱桃红色。色素对pH不敏感。葡糖天冬素琼脂:基丝好,反面暗酒红色;无孢囊。可溶色素酒红色。甘油天冬素琼脂:基丝贫乏,反面杏色;孢囊很少。可溶色素无或很浅的酒红色。无机盐淀粉琼脂:基丝好,反面老酒红色;有孢囊或少;可溶色素浅酒红色。苹果酸钙琼脂:基丝贫乏,反面酒红色;孢囊少;可溶色素玫瑰酒红色。酵母精麦芽精琼脂:基丝反面鸟木褐色;孢囊很少;可溶色素深红色。燕麦粉琼脂:基丝好,反面酒红色;有孢囊;可溶色素酒红色。酪氨酸琼脂:基丝贫乏,酒红色;孢囊无或很少,可溶色素深红色。营养琼脂:基丝贫乏,反面酒红色,无孢囊;可溶色素浅酒红色。贝氏琼脂:基丝好,反面乌木褐色;无孢囊;可溶色素酒红红色。明胶液化。牛奶凝固并胨化。硝酸盐不还原。不产生类黑色素和酪氨酸酶。生长适温25—37℃;42℃不生长。耐 NaCl3%。细胞壁II型,含3羟基二氨基庚二酸、甘氨酸、迹量内消旋二氨基庚二酸以及木糖和迹量阿拉伯糖。产生指霉素(dactimicin)。
三、菌种的培养
1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种(一级种)、原种(二级种)和栽培种(三级种)三级。工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。
2、挑选具有某种能力的有用菌种,也称种子制备,是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。
3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。
4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25℃(或较高温度)下培养5~7天(或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子(对于霉菌类孢子制备,多数采用大米、小米之类的天然培养基)。
5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。
6、如果有些生产菌种不产孢子,如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米浆),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。
四、保藏方法
1、传代培养保藏法
又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等(后者作保藏厌氧细菌用),培养后于4-6℃冰箱内保存。
2、液体石蜡覆盖保藏法
是传代培养的变相方法,能够适当延长保藏时间,它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡,一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡,另一方面可阻止氧气进入,以减弱代谢作用。
3、载体保藏法
是将微生物吸附在适当的载体,如土壤、沙子、硅胶、滤纸上,而后进行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。
4、寄主保藏法
用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物,如病毒、立克次氏体、螺旋体等,它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代,此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。
5、冷冻保藏法
可分低温冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快速冻结(约-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。
6、冷冻干燥保藏法
产品仅用于科研先使微生物在极低温度(-70℃左右)下快速冷冻,然后在减压下利用升华现象除去水分(真空干燥)。有些方法如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻干燥保藏法等均需使用保护剂来制备细胞悬液,以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害。保护性溶质可通过氢和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型。保护剂有牛乳、血清、糖类、甘油、二甲亚砜等。
五、注意事项
1)冻干首次活化,干粉要全部用完,不能预留,用无菌吸管吸取 0.3ml 的培养液(即以上建议的培养基配方,不加琼脂)或者无菌水,滴入冻干管中,轻轻振荡至其溶解。吸取全部菌悬液,接种在培养基上(建议不超过 2 支斜面或平板;或直接接种液体培养基,以不超过 5ml 为宜);
2)经过冷冻干燥保藏,菌种处于休眠状态,复苏培养时可能会延迟生长,这时需较长的培养时间; 若您收到的是已复苏的培养物(非冻干菌),则可以直接用于您的实验,或根据需要转接培养;如有不明白之处,请务必先咨询我单位技术人员,避免不必要的损失;二次接种量要多,固体斜面培养基水分要少才能让菌体长得比较明显,液体培养要静止培养;
3)微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方,室温放置时间过长会导致菌种衰退;
4)菌种操作应在无菌条件下进行;转种完毕,应经灭菌再做丢弃处理;
5)应根据菌种状况及时转接,冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年;
6)菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降,应及时和微生物菌种查询网联系;
7)如若有菌种复苏不活或者污染等情况,请在收到后 2 个月内联系,逾期不予受理;
8)打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行,生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作,打管时冻干管应远离面部,保护眼睛;
9)安瓿瓶开封:用浸过 75%酒精的脱脂棉擦净安瓿管,用火焰加热其顶端,滴少量(2-3滴)无菌水至加热顶端使之破裂,用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口处在火焰上过一遍,并保持在火焰旁操作;
10)甘油管使用:使用本甘油菌时可以不用完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用,但随着冻融次数的增加,细菌的活力会逐渐下降;
11)西林瓶开封:用 75%酒精棉擦拭西林瓶外部,在安全柜内使用尖嘴钳去除塑料盖及铝盖, 注意不要同时打开胶塞。缓慢开启胶塞,用 75%酒精棉消毒瓶口部分,使用无菌吸管注入 0.5ml 适宜的液体培养基复溶冻干粉末。
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