NCTC clone 929 小鼠成纤维细胞 百欧博伟生物
一、细胞简介
平台编号:bio-73078
规格:1×10?cells/T25培养瓶
拉丁属名:NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L]
细胞名称:小鼠成纤维细胞
种属:小鼠
年龄(性别):雄;100日龄
组织来源:组织:皮下结缔组织;疏松结缔组织及脂肪 品系:C3H/An
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
背景描述:NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L]细胞是1948年3月建立的细胞系L的克隆株;细胞系L是最早建立的连续培养细胞系之一,而NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L]是最早的克隆株。从一只100日龄的雄性C3H/An小鼠的皮下疏松结缔组织入脂肪组织中建立了亲本细胞系L,第95代的细胞系L使用毛细管法分离单细胞建立了NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L]。
生长培养基:MEM(货号:PM150410)+10% FBS(货号:164210-500)+1% P/S(货号:PB180120)
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5% 温度:37℃
注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
二、小鼠成纤维细胞的生长条件
培养基:90%高糖DMEM+10%FBS
血清:10% FBS (Diagnovum )
温度:37 ℃
空气条件:5% CO2,95% AIR
冻存条件:培养基50%、血清40%、DMSO 10%
三、小鼠成纤维细胞接收后的操作流程与注意事项
1、细胞收到后建议在培养箱稳定4小时左右再依据细胞密度,换液培养或传代。
2、如果细胞为贴壁细胞,而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞及时离心,加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶中继续培养3天;同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基,培养2-3天。若3天后细胞都没有出现增殖而是继续脱落死亡,请及时联系实验室,技术人员会跟进解决。
3、贴壁细胞生长缓慢:适当提高血清浓度(最高不超过20%),或可根据该细胞生长密度,考虑胰酶消化后,转移到新的培养瓶继续培养。
4、生长不均:贴壁细胞若出现生长不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重新打散细胞,加入新鲜培养基进行培养。
四、小鼠成纤维细胞的常规培养传代流程(请严格遵守无菌操作)
1、吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加1~2 ml 0.25% EDTA的胰酶消化(注意把握消化时间,通常控制在1~2min)。
2、镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁运动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6~8ml 完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落、吹散。
3、取出部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,于培养箱中培养。
4、注意培养基PH值变化情况,定期换液,待细胞密度达到70-80%时重复传代操作或者冻存。
五、小鼠成纤维细胞特别注意:(如使用公共实验室或初次接触细胞培养,建议添加双抗培养)
1、收到细胞后请尽快更换为含10% FBS的新鲜培养基,切勿使用原瓶中运输用培养基。
2、如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时拍照并联系实验室。
3、细胞任何售后问题,均需拍照存档并及时联系客服。
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