发光假蜜环菌的保藏方法与注意事项!
发光假蜜环菌又称亮菌(Armillariellatabescens),担子菌类真菌,药用菌。用于治病是我国首创,它含假蜜环菌甲素(ArmillarisinA)系香豆素类化合物,是治疗胆道感染的一种有效成分。假蜜环菌对于治疗胆囊炎、急性或慢性肝炎和迁延性慢性肝炎有一定的效果。云芝、树舌和双孢蘑菇都具有保肝功能。变绿红菇(Russulavirescens)有明目、泻肝火、散内热等功效。冬虫夏草对四氯化碳导致的大鼠肝纤维化有防治作用。
一、菌种简介
平台编号:bio-52016
规格:斜面/平面常温(冻干粉:-20℃)
拉丁属名:Armillariella tabescens (Scopoci : Fries) Singer
菌种名称:发光假蜜环菌
其它编号:AS5.92
培养基编号:17
培养温度:25-28℃
培养时间:10-15 天
用途:治疗胆囊炎和食管癌。果树病原菌,食用和药用
注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
二、培养基
综合马铃薯培养基(PDA)
20%马铃薯汁 1L 葡萄糖 20g MgSO4.7H2O 1.5g KH2PO4 3g
Vitanib B1 (硫胺素) Trace 微量约 8mg Agar (琼脂) 20g pH 自然
20%马铃薯汁配制方法:马铃薯洗净去皮,取 200 克切成小块 , 加水 1000 毫升煮沸 20 分钟后滤去马铃薯块,将滤液补足 1000ml。
三、保藏条件
斜面菌种应在 2-8°C 保存。并定期转接。
四、保藏方法
1、传代培养保藏法
又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等(后者作保藏厌氧细菌用),培养后于4-6℃冰箱内保存。
2、液体石蜡覆盖保藏法
是传代培养的变相方法,能够适当延长保藏时间,它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡,一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡,另一方面可阻止氧气进入,以减弱代谢作用。
3、载体保藏法
是将微生物吸附在适当的载体,如土壤、沙子、硅胶、滤纸上,而后进行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和滤纸保法应用相当广泛。
4、寄主保藏法
用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物,如病毒、立克次氏体、螺旋体等,它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代,此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。
5、冷冻保藏法
可分低温冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快速冻结(约-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。
6、冷冻干燥保藏法
先使微生物在极低温度(-70℃左右)下快速冷冻,然后在减压下利用升华现象除去水分(真空干燥)。有些方法如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻干燥保藏法等均需使用保护剂来制备细胞悬液,以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害。保护性溶质可通过氢和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型。保护剂有牛乳、血清、糖类、甘油、二甲亚砜等。
五、注意事项
1)如有不明白之处,请务必先咨询我单位技术人员,避免不必要的损失;
2)微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方,室温放置时间过长会导致菌种衰退;
3)菌种操作应在无菌条件下进行;转种完毕,应经灭菌再做丢弃处理;
4)斜面菌种保藏时间通常为 6 个月,应根据菌种状况及时转接;
5)菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降,应及时和中国微生物菌种查询网联系。
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