NALM-6(人B淋巴白血癌细胞)百欧博伟生物
一、细胞简介
平台编号:bio-105836
规格:1ml/T75
拉丁属名:NALM-6(人B淋巴白血癌细胞)
细胞名称:人B淋巴白血癌细胞
细胞数:1*10(6)
生物安全级别:1
生物体:人
组织来源:B淋巴白血病细胞
细胞特性:悬浮
二、细胞接收后的操作流程与注意事项:
1、如果细胞为贴壁细胞,而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天;同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基培养3天。3天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡,请及时联系实验室技术人员会跟进解决。
2、贴壁细胞生长缓慢;适当提高血清浓度(最高不能超过20%),或可根据该细胞生长密度,考虑胰酶消化后,转移到新的培养瓶继续培养。
3、生长不均:贴壁细胞若出现分布不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重悬打散细胞,加入新鲜培养基进行培养。
三、细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)
1、吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,NALM-6:人B淋巴白血病细胞加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在1-2min)。
2、镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散。
3、取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。
4、注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存。
四、特别注意:(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养,建议添加双抗培养)
1、收到细胞后请尽快更换为含15%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清,(原瓶培养基的继续使用时间*长不宜超过72小时)。
2、贴壁细胞收到当天切忌立刻消化,请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代,请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养。
3、如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
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