pCAMBIA2300植物表达质粒
基本信息
启动子: Lac,CaMV 35S
复制子: pVS1 oriV,ori
质粒分类: 植物系列,蛋白过表达载体
质粒大小: 8743bp
原核抗性: Kan
筛选标记: Neo
克隆菌株: DH5α
培养条件: 37℃,有氧 LB
表达宿主: 植物细胞
5'测序引物: 35S:GACGCACAATCCCACTATCC
3'测序引物: 根据序列设计引物
质粒简介
The pCambia2300 vector offers: 1.High copy number in E.coli for high DNA yields 2. pVS1 replicon for high stability in Agrobacterium3.Small size 4.Restriction sites designed for modular plasmid modifications and small but adequate poly-linkers for introducing your DNA of interest 5. Bacterial selection with kanamycin
![pCAMBIA23001.png pCAMBIA23001.png](https://img1.17img.cn/17img/images/201908/uepic/a17653dd-ed8b-417a-8d99-30dd3861f526.jpg)
质粒图谱![pCAMBIA2300.png pCAMBIA2300.png](https://img1.17img.cn/17img/images/201908/uepic/e2a58ad8-aeab-48dd-80d9-a2fd1c9d5ad5.jpg)
pCAMBIA2300植物表达质粒使用说明:
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒,室温放置1min;
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;
3、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min;
4、42℃热激90s,再冰浴2min;
5、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min;
6、6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;
8、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h;
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒。
pCAMBIA2300植物表达质粒注意事项:
1、如果您收到的是甘油菌种,请先四区划线,挑取单克隆培养。
2、如果第二天转化平板长的过多,请将质粒按比例稀释后再转化。
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