PCAMBIA1302植物表达质粒
基本信息
启动子: 无
复制子: pVS1 oriV,ori
终止子: NOS
质粒分类: 植物系列,蛋白过表达载体
质粒大小: 10549bp
原核抗性: 卡那霉素Kan
筛选标记: 潮霉素HygR
克隆菌株: 大肠杆菌DH5α
培养条件: 37℃,有氧 LB
表达宿主: 植物细胞
5'测序引物: 根据序列设计引物
3'测序引物: 根据序列设计引物
质粒简介
The pCambia1302 vector offers:1.High copy number in E.coli for high DNA yields2. pVS1 replicon for high stability in Agrobacterium 3.Small size4.Restriction sites designed for modular plasmid modifications and small but adequatepoly-linkers for introducing your DNA of interest5. Bacterial selection with kanamycin6.Plant selection with hygromycin B 7.Simple means to construct translational fusions to gusA reporter genes
质粒图谱
PCAMBIA1302植物表达质粒使用说明:
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒,室温放置1min;
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;
3、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min;
4、42℃热激90s,再冰浴2min;
5、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min;
6、6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;
8、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h;
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒。
PCAMBIA1302植物表达质粒注意事项:
1、如果您收到的是甘油菌种,请先四区划线,挑取单克隆培养。
2、如果第二天转化平板长的过多,请将质粒按比例稀释后再转化。
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