蛋白磷酸酶抑制剂混合液

蛋白磷酸酶抑制剂混合液本实验方法的基本原理是，在高盐状态下，硅胶膜专一性地吸附DNA；而在低盐或水溶液状态下，DNA被洗脱下来。此法简便快捷，可在30分钟内同时提纯二十多个样品。从3～5ml培养过夜的含高拷贝质粒的菌液中可以获得10～20μg高纯度的质粒DNA，用于酶切、转化、DNA自动测序和手工测序等。

蛋白磷酸酶抑制剂混合液是一种使用破壁酶(Lyticase)消化去除酵母细胞壁，然后采用一种新型的酵母质粒纯化柱实现从酵母细胞中进行小量质粒快速抽提的试剂盒。

1无需酚氯仿抽提，无需酒精沉淀，12个样品只需约1-1.5小时即可完成。

2试剂盒提供了破壁酶(Lyticase)，酵母收集后，加入Lyticase消化去除细胞壁，接着采用传3统碱裂法裂解细胞，然后将获得的上清液转移至结合柱结合DNA，经过离心快速洗涤，最后用洗脱液洗脱出酵母质粒DNA。

4由于采用了高浓度的破壁酶，无需再使用玻璃珠，可以避免因为玻璃珠的机械作用带来的酵母基因组DNA污染。

蛋白磷酸酶抑制剂混合液纯化柱可以结合的质粒量的上限约为20微克。质粒DNA的产量依赖于酵母携带质粒的拷贝数，酵母菌株以及生长条件。通常酵母质粒的拷贝数较低，1.5-5ml培养过夜的酵母抽提获得的质粒DNA量约为1-3微克左右。高拷贝酵母质粒抽提时的得率会大大提高。抽提所得质粒的量与酵母培养浓度、质粒拷贝数、酵母品系等因素有关。

使用本试剂盒抽提得到的酵母质粒DNA可用于各种常规分子生物学实验，如转化、PCR、基于PCR的突变、体外转录、酶切、测序、文库筛选等。

蛋白磷酸酶抑制剂混合液相关产品如下：

81221-30 无浓缩胶SDS-PAGE电泳套装 

80810-30 一站式SDS-PAGE蛋白电泳套装 

100867-500 SDS-PAGE浓缩胶配胶液 

100868-500 SDS-PAGE分离胶配胶液 

81204-1 SDS-PAGE上样液 

81204-10 SDS-PAGE上样液 

81203-5 SDS-PAGE电泳液干粉 

81203-20 SDS-PAGE电泳液干粉 

81213-5 Tricine-SDS-PAGE上样液 

81213-30 Tricine-SDS-PAGE上样液 

81205-250 Tricine-SDS-PAGE配胶液 

81205-1000 Tricine-SDS-PAGE配胶液 

100864-10 Tricine-SDS-PAGE阳极电泳液（干粉） 

100864-50 Tricine-SDS-PAGE阳极电泳液（干粉） 

100865-10 Tricine-SDS-PAGE阴极电泳液（干粉） 

100865-50 Tricine-SDS-PAGE阴极电泳液（干粉） 

100866          通用PAGE胶固定液 

90311        三（羟甲基）甲基甘氨酸(Tricine) 

100869 蛋白非变性-PAGE浓缩胶缓冲液 

100870 蛋白非变性-PAGE分离胶缓冲液 

100871        蛋白非变性-PAGE上样液，6× 

100872        蛋白非变性-PAGE电泳液（干粉） 

分子量标准

70704A     预染蛋白质电泳分子量标准 

70704B        预染蛋白质电泳分子量标准 

70103-1 蛋白质电泳及转膜示踪剂 

70102A   蛋白质电泳分子量标准