金标记亲和素本实验方法的基本原理是,在高盐状态下,硅胶膜专一性地吸附DNA;而在低盐或水溶液状态下,DNA被洗脱下来。此法简便快捷,可在30分钟内同时提纯二十多个样品。从3~5ml培养过夜的含高拷贝质粒的菌液中可以获得10~20μg高纯度的质粒DNA,用于酶切、转化、DNA自动测序和手工测序等。
金标记亲和素是一种使用破壁酶(Lyticase)消化去除酵母细胞壁,然后采用一种新型的酵母质粒纯化柱实现从酵母细胞中进行小量质粒快速抽提的试剂盒。
1无需酚氯仿抽提,无需酒精沉淀,12个样品只需约1-1.5小时即可完成。
2试剂盒提供了破壁酶(Lyticase),酵母收集后,加入Lyticase消化去除细胞壁,接着采用传3统碱裂法裂解细胞,然后将获得的上清液转移至结合柱结合DNA,经过离心快速洗涤,最后用洗脱液洗脱出酵母质粒DNA。
4由于采用了高浓度的破壁酶,无需再使用玻璃珠,可以避免因为玻璃珠的机械作用带来的酵母基因组DNA污染。
金标记亲和素纯化柱可以结合的质粒量的上限约为20微克。质粒DNA的产量依赖于酵母携带质粒的拷贝数,酵母菌株以及生长条件。通常酵母质粒的拷贝数较低,1.5-5ml培养过夜的酵母抽提获得的质粒DNA量约为1-3微克左右。高拷贝酵母质粒抽提时的得率会大大提高。抽提所得质粒的量与酵母培养浓度、质粒拷贝数、酵母品系等因素有关。
使用本试剂盒抽提得到的酵母质粒DNA可用于各种常规分子生物学实验,如转化、PCR、基于PCR的突变、体外转录、酶切、测序、文库筛选等。
金标记亲和素相关产品如下:
90211-100 低载量PCR片段纯化试剂盒
90212-50 高载量PCR片段纯化试剂盒
90212-100 高载量PCR片段纯化试剂盒
100201-5 海量PCR片段纯化试剂盒
80919-1 96孔板PCR片段纯化回收试剂盒
80919-5 96孔板PCR片段纯化回收试剂盒
60706-30 一管式胶回收试剂
60706-100 一管式胶回收试剂
70908-30 PAGE DNAback
70908-100 PAGE DNAback
80202-50 柱式PAGE DNAback
80401-50 柱式OLIGOback
80204-50 柱式RNAclean
70604-40 小RNA胶回收试剂盒
80203-50 柱式miRNAback
60601-3 DNA UV防护剂
100876-250 丙烯酰胺干粉
100877-25 甲叉双丙烯酰胺干粉
100879-1 过硫酸铵
100879-25 过硫酸铵
100880-30 TEMED
100881-100 10%SDS溶液,电泳级
81105-100 琼脂糖
60409-50 通用溶胶液
90603-5 随机引物法DNA探针标记试剂盒系列
90604-5 PCR法DNA探针标记试剂盒系列
90605-5 TdT加尾法DNA探针标记试剂盒系列
100210B 非同位素标记底物
金标记亲和素信息由上海沪震生物科技有限公司为您提供,如您想了解更多关于金标记亲和素报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。除供应金标记亲和素外,上海沪震生物科技有限公司还可为您提供PLCγ1 (Ab-783) 抗体、JAK2 (Ab-1007) 抗体、ASK1 (Ab-83) 抗体等产品,公司有专业的客户服务团队,是您值得信赖的合作伙伴。