卢戈液实验步骤
HRP的制备
卢戈液水提取:称取5kg用水冲刷干净的鲜辣根(辣根皮中亦含有丰富的HRP),用菜刀切成小碎块,在绞肉机中绞碎1~2次。碎渣浆用1倍体积的水低温下搅拌提取过夜(亦可采用高速抽提法)。次日用甩干机(或离心机)甩干,收集滤液,碎渣再用1/4倍体积水浸泡提取1次,合并2次滤液,测得总体积。
卢戈液硫酸铵分级分离:在不断搅拌下,每1000mL滤液中慢慢加入226g硫酸铵粉末(相当于0.40饱和度,0℃),大约在1~2h内加完,置冷室中放置过夜。次日将上清液小心地用虹吸管移出,下面混浊液以3 000r/min离心15min,弃沉淀,合并上清液。再按每1000mL上清液加258g硫酸铵粉末(0.8饱和度)随加随搅拌,当硫酸铵全部溶解后,置冷室过夜。次日,虹吸出上清液,沉淀部分在冰冻离心机中以13000r/min离心20min,弃去上清液,收集沉淀。将沉淀悬浮于100~150mL蒸馏水中(加水量要使沉淀全部溶解为止),分装于透析袋内,放在流动自来水中进行透析1~2天,直到硫酸铵透析完毕为止(可用5%乙酸钡溶液或奈氏试剂进行检查)。然后改换成用蒸馏水透析,中间更换2~3次,用0.1mol/L硝酸银溶液检查透析外液无氯离子为止。将透析液合并,在冰冻离心机中以4 000r/min离心15min,弃去沉淀,量上清液的体积。
卢戈液丙酮分级分离:将上清液倒入烧杯并置冰盐浴中,在不断搅拌下,用细滴管沿杯壁加入1倍体积预冷至-15℃的丙酮,放置片刻,在冰冻离心机中以4000r/min离心15min,弃去沉淀。上清液再加入0.8体积(按原上清液体积)-15℃丙酮,(操作同上),静置后,在冰冻离心机中离心收集沉淀。将沉淀溶于少量蒸馏水中,透析除去丙酮。可得RZ值近于1的酶溶液。
卢戈液精制:将上步酶液适当稀释,滴加1mol/L硫酸锌溶液,使酶液中锌离子浓度为10 -3 mol/L,5 000r/min离心10min,得上清液。再将沉淀用少量蒸馏水洗涤,离心,洗液与清液合并,分装于透析袋内,用水透析除盐,用微孔滤膜过滤,进行真空冰冻干燥(约得20mg),产品呈米黄色纤维状松软物,HRP产品的RZ值可达3.0左右,置真空干燥器中低温保存。
HZA580Hu 中文名称:人水通道蛋白2(AQP2)ELISA试剂盒 英文名称:for Aquaporin 2, Collecting Duct (AQP2)ELISAkit 规格:48T/96T
HZA578Hu 中文名称:人水通道蛋白9(AQP9)ELISA试剂盒 英文名称:for Aquaporin 9 (AQP9)ELISAkit 规格:48T/96T
HZA379Hu 中文名称:人胰岛素原(PI)ELISA试剂盒 英文名称:for Proinsulin (PI)ELISAkit 规格:48T/96T
HZA807Hu 中文名称:人岩藻糖苷酶αL1(FUCα1)ELISA试剂盒 英文名称:for Fucosidase Alpha L1, Tissue (FUCa1)ELISAkit 规格:48T/96T
HZA557Hu 中文名称:人甲状腺过氧化物酶(TPO)ELISA试剂盒 英文名称:for Thyroid Peroxidase (TPO)ELISAkit 规格:48T/96T
CEA380Hu 中文名称:人血管活性肠肽(VIP)ELISA试剂盒 英文名称:for Vasoactive Intestinal Peptide (VIP)ELISAkit 规格:48T/96T
CEA393Hu 中文名称:人P物质(SP)ELISA试剂盒 英文名称:for Substance P (SP)ELISAkit 规格:48T/96T
HZA902Hu 中文名称:人抗酒石酸酸性磷酸酶(ACP5)ELISA试剂盒 英文名称:for Acid Phosphatase 5, TartRate Resistant (ACP5)ELISAkit 规格:48T/96T
HZA386Hu 中文名称:人脂蛋白脂酶(LIPD)ELISA试剂盒 英文名称:for Lipase, Lipoprotein (LIPD)ELISAkit 规格:48T/96T
HZA821Hu 中文名称:人C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒 英文名称:for C Reactive Protein (CRP)ELISAkit 规格:48T/96T
HZA794Hu 中文名称:人周期素依赖性激酶抑制因子2A(CDKN2A)ELISA试剂盒 英文名称:for Cyclin Dependent Kinase Inhibitor 2A (CDKN2A)ELISAkit 规格:48T/96T
HZA606Hu 中文名称:人脑红蛋白(NGB)ELISA试剂盒 英文名称:for Neuroglobin (NGB)ELISAkit 规格:48T/96T
CEA607Hu 中文名称:人食欲素A(OXA)ELISA试剂盒 英文名称:for Orexin A (OXA)ELISAkit 规格:48T/96T
HZA579Hu 中文名称:人水通道蛋白1(AQP1)ELISA试剂盒 英文名称:for Aquaporin 1, Colton Blood Group (AQP1)ELISAkit 规格:48T/96T
HZA581Hu 中文名称:人水通道蛋白3(AQP3)ELISA试剂盒 英文名称:for Aquaporin 3, Gill Blood Group (AQP3)ELISAkit 规格:48T/96T
HZA582Hu 中文名称:人水通道蛋白4(AQP4)ELISA试剂盒 英文名称:for Aquaporin 4 (AQP4)ELISAkit 规格:48T/96T
HZA583Hu 中文名称:人水通道蛋白5(AQP5)ELISA试剂盒 英文名称:for Aquaporin 5 (AQP5)ELISAkit 规格:48T/96T
HZA394Hu 中文名称:人组织因子通道抑制因子(TFPI)ELISA试剂盒 英文名称:for Tissue Factor Pathway Inhibitor (TFPI)ELISAkit 规格:48T/96T
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