2,4-二硝基苯肼

2,4-二硝基苯肼实验步骤

HRP的制备

2,4-二硝基苯肼水提取：称取5kg用水冲刷干净的鲜辣根(辣根皮中亦含有丰富的HRP)，用菜刀切成小碎块，在绞肉机中绞碎1～2次。碎渣浆用1倍体积的水低温下搅拌提取过夜(亦可采用高速抽提法)。次日用甩干机(或离心机)甩干，收集滤液，碎渣再用1/4倍体积水浸泡提取1次，合并2次滤液，测得总体积。

2,4-二硝基苯肼硫酸铵分级分离：在不断搅拌下，每1000mL滤液中慢慢加入226g硫酸铵粉末(相当于0.40饱和度，0℃)，大约在1~2h内加完，置冷室中放置过夜。次日将上清液小心地用虹吸管移出，下面混浊液以3 000r/min离心15min，弃沉淀，合并上清液。再按每1000mL上清液加258g硫酸铵粉末(0.8饱和度)随加随搅拌，当硫酸铵全部溶解后，置冷室过夜。次日，虹吸出上清液，沉淀部分在冰冻离心机中以13000r/min离心20min，弃去上清液，收集沉淀。将沉淀悬浮于100~150mL蒸馏水中(加水量要使沉淀全部溶解为止)，分装于透析袋内，放在流动自来水中进行透析1～2天，直到硫酸铵透析完毕为止(可用5%乙酸钡溶液或奈氏试剂进行检查)。然后改换成用蒸馏水透析，中间更换2~3次，用0.1mol/L硝酸银溶液检查透析外液无氯离子为止。将透析液合并，在冰冻离心机中以4 000r/min离心15min，弃去沉淀，量上清液的体积。

2,4-二硝基苯肼丙酮分级分离：将上清液倒入烧杯并置冰盐浴中，在不断搅拌下，用细滴管沿杯壁加入1倍体积预冷至-15℃的丙酮，放置片刻，在冰冻离心机中以4000r/min离心15min，弃去沉淀。上清液再加入0.8体积(按原上清液体积)-15℃丙酮，(操作同上)，静置后，在冰冻离心机中离心收集沉淀。将沉淀溶于少量蒸馏水中，透析除去丙酮。可得RZ值近于1的酶溶液。

2,4-二硝基苯肼精制：将上步酶液适当稀释，滴加1mol/L硫酸锌溶液，使酶液中锌离子浓度为10 -3 mol/L，5 000r/min离心10min，得上清液。再将沉淀用少量蒸馏水洗涤，离心，洗液与清液合并，分装于透析袋内，用水透析除盐，用微孔滤膜过滤，进行真空冰冻干燥(约得20mg)，产品呈米黄色纤维状松软物，HRP产品的RZ值可达3.0左右，置真空干燥器中低温保存。

HZA040Hu 中文名称：人趋化因子C-X3-C-基元配体1(CX3CL1)ELISA试剂盒 英文名称：for  Chemokine C-X3-C-Motif Ligand 1 (CX3CL1)ELISAkit 规格：48T/96T

HZA041Hu 中文名称：人中性粒细胞激活蛋白3(NAP3)ELISA试剂盒 英文名称：for  Neutrophil Activating Protein 3 (NAP3)ELISAkit 规格：48T/96T

HZA042Hu 中文名称：人粒细胞集落刺激因子(GCSF)ELISA试剂盒 英文名称：for  Colony Stimulating Factor 3, Granulocyte (GCSF)ELISAkit 规格：48T/96T

HZA043Hu 中文名称：人胶质细胞系来源神经营养因子(GDNF)ELISA试剂盒 英文名称：for  Glial Cell Line Derived Neurotrophic Factor (GDNF)ELISAkit 规格：48T/96T

HZA044Hu 中文名称：人生长激素(GH)ELISA试剂盒 英文名称：for  Growth Hormone (GH)ELISAkit 规格：48T/96T

HZA045Hu 中文名称：人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)ELISA试剂盒 英文名称：for  Colony Stimulating Factor 2, Granulocyte Macrophage (GMCSF)ELISAkit 规格：48T/96T

HZA046Hu 中文名称：人糖蛋白130(gp130)ELISA试剂盒 英文名称：for  Glucoprotein 130 (gp130)ELISAkit 规格：48T/96T

HZA047Hu 中文名称：人肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒 英文名称：for  Hepatocyte Growth Factor (HGF)ELISAkit 规格：48T/96T

HZA548Hu 中文名称：人细胞间粘附分子1(ICAM1)ELISA试剂盒 英文名称：for  Intercellular Adhesion Molecule 1 (ICAM1)ELISAkit 规格：48T/96T

HZA049Hu 中文名称：人干扰素γ(IFNγ)ELISA试剂盒 英文名称：for  Interferon Gamma (IFNg)ELISAkit 规格：48T/96T

HZA592Hu 中文名称：人生长抑素(SST)ELISA试剂盒 英文名称：for  Somatostatin (SST)ELISAkit 规格：48T/96T

CEA575Hu 中文名称：人胃动素(MTL)ELISA试剂盒 英文名称：for  Motilin (MTL)ELISAkit 规格：48T/96T

CEA876Hu 中文名称：人降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA试剂盒 英文名称：for  Calcitonin Gene Related Peptide (CGRP)ELISAkit 规格：48T/96T

HZA875Hu 中文名称：人碳酸酐酶Ⅰ(CA1)ELISA试剂盒 英文名称：for  Carbonic Anhydrase I (CA1)ELISAkit 规格：48T/96T

HZA469Hu 中文名称：人内皮脂肪酶(LIPG)ELISA试剂盒 英文名称：for  Lipase, Endothelial (LIPG)ELISAkit 规格：48T/96T

HZA800Hu 中文名称：人妊娠关联血浆蛋白A(PAPPA)ELISA试剂盒 英文名称：for  Pregnancy Associated Plasma Protein A (PAPPA)ELISAkit 规格：48T/96T

HZA399Hu 中文名称：人高迁移率族蛋白1(HMG1)ELISA试剂盒 英文名称：for  High Mobility Group Protein 1 (HMG1)ELISAkit 规格：48T/96T

HZA397Hu 中文名称：人转化生长因子β受体Ⅰ(TGFβR1)ELISA试剂盒 英文名称：for  Transfor ming Growth Factor Beta Receptor I (TGFbR1)ELISAkit 规格：48T/96T

HZA396Hu 中文名称：人性激素结合球蛋白(SHBG)ELISA试剂盒 英文名称：for  Sex Hormone Binding Globulin (SHBG)ELISAkit 规格：48T/96T

HZA395Hu 中文名称：人抑制素A(INHA)ELISA试剂盒 英文名称：for  Inhibin A (INHA)ELISAkit 规格：48T/96T