总蛋白定量测试盒(带标准:BCA法)实验步骤
HRP的制备
总蛋白定量测试盒(带标准:BCA法)水提取:称取5kg用水冲刷干净的鲜辣根(辣根皮中亦含有丰富的HRP),用菜刀切成小碎块,在绞肉机中绞碎1~2次。碎渣浆用1倍体积的水低温下搅拌提取过夜(亦可采用高速抽提法)。次日用甩干机(或离心机)甩干,收集滤液,碎渣再用1/4倍体积水浸泡提取1次,合并2次滤液,测得总体积。
总蛋白定量测试盒(带标准:BCA法)硫酸铵分级分离:在不断搅拌下,每1000mL滤液中慢慢加入226g硫酸铵粉末(相当于0.40饱和度,0℃),大约在1~2h内加完,置冷室中放置过夜。次日将上清液小心地用虹吸管移出,下面混浊液以3 000r/min离心15min,弃沉淀,合并上清液。再按每1000mL上清液加258g硫酸铵粉末(0.8饱和度)随加随搅拌,当硫酸铵全部溶解后,置冷室过夜。次日,虹吸出上清液,沉淀部分在冰冻离心机中以13000r/min离心20min,弃去上清液,收集沉淀。将沉淀悬浮于100~150mL蒸馏水中(加水量要使沉淀全部溶解为止),分装于透析袋内,放在流动自来水中进行透析1~2天,直到硫酸铵透析完毕为止(可用5%乙酸钡溶液或奈氏试剂进行检查)。然后改换成用蒸馏水透析,中间更换2~3次,用0.1mol/L硝酸银溶液检查透析外液无氯离子为止。将透析液合并,在冰冻离心机中以4 000r/min离心15min,弃去沉淀,量上清液的体积。
总蛋白定量测试盒(带标准:BCA法)丙酮分级分离:将上清液倒入烧杯并置冰盐浴中,在不断搅拌下,用细滴管沿杯壁加入1倍体积预冷至-15℃的丙酮,放置片刻,在冰冻离心机中以4000r/min离心15min,弃去沉淀。上清液再加入0.8体积(按原上清液体积)-15℃丙酮,(操作同上),静置后,在冰冻离心机中离心收集沉淀。将沉淀溶于少量蒸馏水中,透析除去丙酮。可得RZ值近于1的酶溶液。
总蛋白定量测试盒(带标准:BCA法)精制:将上步酶液适当稀释,滴加1mol/L硫酸锌溶液,使酶液中锌离子浓度为10 -3 mol/L,5 000r/min离心10min,得上清液。再将沉淀用少量蒸馏水洗涤,离心,洗液与清液合并,分装于透析袋内,用水透析除盐,用微孔滤膜过滤,进行真空冰冻干燥(约得20mg),产品呈米黄色纤维状松软物,HRP产品的RZ值可达3.0左右,置真空干燥器中低温保存。
hz-E11511 中文名称:人胰岛素自身抗体(IAA)ELISA试剂盒 英文名称:Human insulin autoantibodies,IAA ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11512 中文名称:人谷氨酸脱羧酶(GAD)ELISA试剂盒 英文名称:Human glutamic acid decarboxylase,GAD ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11513 中文名称:人胸腺五肽(TP-5)ELISA试剂盒 英文名称:Human Thymopentin,TP-5 ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11514 中文名称:人胸腺肽(Thymosin)ELISA试剂盒 英文名称:Human Thymosin ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11515 中文名称:人未磷酸化类胰岛素生长因子结合蛋白-1ELISA试剂盒 英文名称:Human Non-Phosphorylated Insulin-like growth factor binding protein 1 ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11516 中文名称:人甲状旁腺激素样蛋白(PLP)ELISA试剂盒 英文名称:Human paRathyroid hormone-like protein,PLP ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11517 中文名称:人内脂素/内脏脂肪素(visfatin)ELISA试剂盒 英文名称:Human visfatin ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11518 中文名称:人apelin 12(AP12)ELISA Ki 英文名称:Human apelin 12,AP12 ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11519 中文名称:人葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)ELISA试剂盒 英文名称:Human Glucose dependent insulin releasing polypeptide,GIP ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11520 中文名称:人胰岛素原(PI)ELISA试剂盒 英文名称:Human Proinsulin,PI ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11521 中文名称:人胰岛素受体β(ISR-β)ELISA试剂盒 英文名称:Human Insulin Receptor β,ISR-β ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11522 中文名称:人糖化血红蛋白A1c(GHbA1c)ELISA试剂盒 英文名称:Human Glycated hemoglobin A1c,GHbA1c ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11523 中文名称:人胰高血糖素样肽1(GLP-1)ELISA试剂盒 英文名称:Human ghcagons-like pepfide 1,GLP-1 ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11524 中文名称:人甲状腺刺激免疫球蛋白(TSI)ELISA试剂盒 英文名称:Human thyroid stimulating immunoglobulin,TSI ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11525 中文名称:人甲状旁腺激素(PTH)ELISA试剂盒 英文名称:Human PaRathyroid hormone,PTH ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11526 中文名称:人甲肟前列腺素D2(PGD2-MOX)ELISA试剂盒 英文名称:Human Prostaglandin D2-methoxime,PGD2-MOX ELISAkit 规格:48T/96T
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