(1)人尿黑酸1,2-双加氧酶(HGD)检测试剂盒包被液的选择:一般选择ph9.6的碳酸盐缓冲液。但有时由于试验的需要,包被原的特殊性也可能采用中性的缓冲溶液来包。应注意以下原理:由于蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的,靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的作用,这种物理吸附是非特异性的,受蛋白质的分子量、等电点、浓度等的影响,大分子蛋白质较小分子蛋白质通常含有更多的疏水基团,故更易吸附到固相载体表面。具体的试验还要有坚固的理论外也要实践,看一下最终可不可以应用到自己试验当中去。常用的包被液除了刚才提到的pH9.6碳酸盐缓冲液,还有pH7.2的磷酸盐缓冲液和pH7-8的Tris-HCL缓冲液等等。
(2)人尿黑酸1,2-双加氧酶(HGD)检测试剂盒封闭:继包被之后用高浓度的无关蛋白质溶液再包被的过程。封闭就是让大量不相关的蛋白质充填这些空隙,从而排斥ELISA后的步骤中干扰物质的再吸附。常用封闭剂有:0.05%-0.5%的BSA;10%的小牛血清或1%明胶;脱脂奶粉,比较价廉,可以高浓度使用(5%-10%);还有一些稀有用到的各种动物血清(主要为了排除相似蛋白干扰)和酪蛋白等等。但最终选用什么,要依据试验具体来实践。
(3)人尿黑酸1,2-双加氧酶(HGD)检测试剂盒洗涤板:可以说在ELISA操作中,洗涤是最主要的关键技术。因为聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,为达到分离游离的和结合的酶标记物的目的,清除残留在板孔中游离的物质,以及非特异性地吸附的干扰物质,在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。所以在洗板时会有一定误差,人为因素很大(当然有条件的用洗板机除外),洗的不彻底或串了孔,对如此灵敏的ELISA系统可是不小的影响。
(4)加抗体标本(和二抗):注意该换枪头时换枪头。标本稀释一般可用PBS稀释,也可用封闭液去稀释。如需加二抗,还要注意二抗的工作浓度,太高浪费,太低则着色浅。
(5)人尿黑酸1,2-双加氧酶(HGD)检测试剂盒显色:显色系统又很多,我们一开始做的时候,要选择适宜的显色系统。注意显色系统酶活性底物的保存HRP结合物加硫柳泵,AP结合物可加叠氮钠。
每次做尽量要把阴阳空三个对照做好,如出现问题也好分析。
hzA227Bo 牛亲环素B(CYPB)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Cyclophilin B (CYPB) Bos taurus; Bovine (Cattle)
hzA078Bo 牛白介素5(IL5)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Interleukin 5 (IL5) Bos taurus; Bovine (Cattle)
hzA259Bo 牛膜联蛋白A5(ANXA5)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Annexin A5 (ANXA5) Bos taurus; Bovine (Cattle)
hzA263Bo 牛线粒体肌酸激酶1A(CKMT1A)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Creatine Kinase, Mitochondrial 1A (CKMT1A) Bos taurus; Bovine (Cattle)
hzA079Bo 牛白介素6(IL6)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Interleukin 6 (IL6) Bos taurus; Bovine (Cattle)
hzA080Bo 牛白介素8(IL8)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Interleukin 8 (IL8) Bos taurus; Bovine (Cattle)
hzA085Bo 牛白血病抑制因子(LIF)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Leukemia Inhibitory Factor (LIF) Bos taurus; Bovine (Cattle)
hzA088Bo 牛单核细胞趋化蛋白2(MCP2)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Monocyte Chemotactic Protein 2 (MCP2) Bos taurus; Bovine (Cattle)
hzA091Bo 牛巨噬细胞来源趋化因子(MDC)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Macrophage Derived Chemokine (MDC) Bos taurus; Bovine (Cattle)
hzA267Bo 牛组织蛋白酶K(CTSK)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Cathepsin K (CTSK) Bos taurus; Bovine (Cattle)
hzA274Bo 牛胰岛素样生长因子结合蛋白6(IGFBP6)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 6 (IGFBP6) Bos taurus; Bovine (Cattle)
hzA272Bo 牛转运蛋白1(TNPO1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Transportin 1 (TNPO1) Bos taurus; Bovine (Cattle)
hzA092Bo 牛巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP1α)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Macrophage Inflammatory Protein 1 Alpha (MIP1a) Bos taurus; Bovine (Cattle)
hzA093Bo 牛巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP1β)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Macrophage Inflammatory Protein 1 Beta (MIP1b) Bos taurus; Bovine (Cattle)
hzA095Bo 牛巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP3α)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Macrophage Inflammatory Protein 3 Alpha (MIP3a) Bos taurus; Bovine (Cattle)
hzA096Bo 牛巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP3β)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Macrophage Inflammatory Protein 3 Beta (MIP3b) Bos taurus; Bovine (Cattle)
hzA097Bo 牛基质金属蛋白酶1(MMP1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 1 (MMP1) Bos taurus; Bovine (Cattle)
hzA277Bo 牛间隙连接蛋白43(CX43)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Connexin 43 (CX43) Bos taurus; Bovine (Cattle)
hzA099Bo 牛基质金属蛋白酶13(MMP13)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13) Bos taurus; Bovine (Cattle)
hzA611Bo 牛血小板反应蛋白(THBS1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Thrombospondin 1 (THBS1) Bos taurus; Bovine (Cattle)
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