(1)人脊椎蛋白1(SPON1)检测试剂盒包被液的选择:一般选择ph9.6的碳酸盐缓冲液。但有时由于试验的需要,包被原的特殊性也可能采用中性的缓冲溶液来包。应注意以下原理:由于蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的,靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的作用,这种物理吸附是非特异性的,受蛋白质的分子量、等电点、浓度等的影响,大分子蛋白质较小分子蛋白质通常含有更多的疏水基团,故更易吸附到固相载体表面。具体的试验还要有坚固的理论外也要实践,看一下最终可不可以应用到自己试验当中去。常用的包被液除了刚才提到的pH9.6碳酸盐缓冲液,还有pH7.2的磷酸盐缓冲液和pH7-8的Tris-HCL缓冲液等等。
(2)人脊椎蛋白1(SPON1)检测试剂盒封闭:继包被之后用高浓度的无关蛋白质溶液再包被的过程。封闭就是让大量不相关的蛋白质充填这些空隙,从而排斥ELISA后的步骤中干扰物质的再吸附。常用封闭剂有:0.05%-0.5%的BSA;10%的小牛血清或1%明胶;脱脂奶粉,比较价廉,可以高浓度使用(5%-10%);还有一些稀有用到的各种动物血清(主要为了排除相似蛋白干扰)和酪蛋白等等。但最终选用什么,要依据试验具体来实践。
(3)人脊椎蛋白1(SPON1)检测试剂盒洗涤板:可以说在ELISA操作中,洗涤是最主要的关键技术。因为聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,为达到分离游离的和结合的酶标记物的目的,清除残留在板孔中游离的物质,以及非特异性地吸附的干扰物质,在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。所以在洗板时会有一定误差,人为因素很大(当然有条件的用洗板机除外),洗的不彻底或串了孔,对如此灵敏的ELISA系统可是不小的影响。
(4)加抗体标本(和二抗):注意该换枪头时换枪头。标本稀释一般可用PBS稀释,也可用封闭液去稀释。如需加二抗,还要注意二抗的工作浓度,太高浪费,太低则着色浅。
(5)人脊椎蛋白1(SPON1)检测试剂盒显色:显色系统又很多,我们一开始做的时候,要选择适宜的显色系统。注意显色系统酶活性底物的保存HRP结合物加硫柳泵,AP结合物可加叠氮钠。
每次做尽量要把阴阳空三个对照做好,如出现问题也好分析。
hzD422Hu 人肌球蛋白重链9(MYH9)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Myosin Heavy Chain 9, Non Muscle (MYH9)
hzD423Hu 人肌球蛋白重链10(MYH10)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Myosin Heavy Chain 10, Non Muscle (MYH10)
hzG915Hu 人泛醇细胞色素C还原酶核心蛋白Ⅰ(UQCRC1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Ubiquinol Cytochrome C Reductase Core Protein I (UQCRC1)
hzC108Hu 人生长分化因子1(GDF1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Growth Differentiation Factor 1 (GDF1)
hzB692Hu 人成肌分化蛋白(MyoD)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Myogenic Differentiation (MyoD)
hzH530Hu 人尼克酰胺-N-甲基转移酶(NNMT)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Nicotinamide-N-Methyltransferase (NNMT)
hzG491Hu 人微管关联蛋白RP/EB家族成员1(MAPRE1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Microtubule Associated Protein RP/EB Family, Member 1 (MAPRE1)
hzC107Hu 人骨形成蛋白15(BMP15)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein 15 (BMP15)
hzA498Hu 人补体受体4(CR4)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Complement ReHZptor 4 (CR4)
hzC918Hu 人成纤维细胞生长因子21(FGF21)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 21 (FGF21)
hzG443Hu 人二肽基肽酶10(DPP10)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Dipeptidyl Peptidase 10 (DPP10)
hzH339Hu 人骨膜蛋白(POSTN)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Periostin (POSTN)
hzC192Hu 人Axis抑制蛋白2(AXIN2)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Axis Inhibition Protein 2 (AXIN2)
hzC986Hu 人端锚聚合酶1(TNKS1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Tankyrase 1 (TNKS1)
hzC987Hu 人端锚聚合酶2(TNKS2)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Tankyrase 2 (TNKS2)
hzH586Hu 人肌纤蛋白(MYOC)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Myocilin (MYOC)
hzF368Hu 人肉毒碱棕榈酰基转移酶1A(CPT1A)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Carnitine Palmitoyltransferase 1A, Liver (CPT1A)
hzB000Hu 人白细胞关联免疫球蛋白样受体2(LAIR2)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Leukocyte Associated Immunoglobulin Like ReHZptor 2 (LAIR2)
hzB134Hu 人黑色素瘤关联硫酸软骨素蛋白聚糖(MCSP)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Melanoma Associated Chondroitin Sulfate Proteoglycan (MCSP)
hzC419Hu 人Catheli抗菌肽(CAMP)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Cathelicidin Antimicrobial Peptide (CAMP)
hzC228Hu 人密封蛋白(OCLN)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Occludin (OCLN)
hzC388Hu 人脊椎蛋白1(SPON1)检测试剂盒人封闭蛋白1(CLDN1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Claudin 1 (CLDN1)
hzF294Hu 人封闭蛋白4(CLDN4)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Claudin 4 (CLDN4)
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