小鼠V-Myc骨髓细胞瘤病毒癌基因同源物(MYC)检测试剂盒

温育是小鼠V-Myc骨髓细胞瘤病毒癌基因同源物(MYC)检测试剂盒测定中影响测定成败最为关键的一个因素。小鼠V-Myc骨髓细胞瘤病毒癌基因同源物(MYC)检测试剂盒作为一种固相免疫测定，抗原抗体的结合反应在固相上进行，要使液相中的抗原或抗体与固相上的特异抗体或抗原完全结合，必须在一定的温度条件下反应一定的时间。温育所需时间与温度成反比，即温度越高，则所需时间相对较短。最为常用的温育温度有37℃和室温，其次是43℃和2～8℃。

温育这一步是临床小鼠V-Myc骨髓细胞瘤病毒癌基因同源物(MYC)检测试剂盒测定中最容易出现问题的步骤。通常目前国内ELISA商品试剂盒的反应温育时间为37℃ 30分钟～1小时，进口ELISA试剂盒则通常为37℃ 1～2小时才能有较完全的结合，低于1小时，可能会影响测定下限。因此，关于温育，在实际测定操作中一定要注意以下几点：

（1）要保证在设定的温度下有足够的反应时间。一般来说，加完样本和/或反应试剂后，将微孔板从室温拿至水浴箱或温箱中时，孔内温度从室温升至37℃，需要一定的时间，尤其是在室温比较低以及非水浴的状态下，这段升温时间可能还比较长，而在临床实验室中，很少有人注意这个问题，通常是将微孔板一放入温箱即开始计时，这样就很容易造成实际测定中温育时间不够，弱阳性样本测不出来的问题。曾有一地处南方的血站同行提出了一个问题，就是在每一年的冬季总有那么一个多月的时间，在做HBsAg测定的室内质控中，测定由卫生部临床检验中心供应的1 ng/ml弱阳性样本时，总是测不出来，不知原因为何？这可能就与南方冬天室内温度较低有关，此时微孔板转入温箱后37℃温育时间不够，以致弱阳性样本测定为阴性。因此，为保证37℃下足够的温育时间，小鼠V-Myc骨髓细胞瘤病毒癌基因同源物(MYC)检测试剂盒临床实验室可自行确定本实验室不同季节（不同室温下）微孔板从室温拿至温箱后需要多长时间孔内温度才能达到37℃，从而适当延长板条在温箱中的放置时间。具体的做法是，用一小温度计放置板孔反应溶液中测量观察即可。

（2）温育温度的选择。在有的ELISA试剂盒的说明书中，指出温育温度可有两种，例如，一种是37℃下1小时，另一种则为43℃下45分钟。从免疫测定的抗原抗体反应的本质来看，在较低的温度下反应较长的时间最为完全。如2～8℃下反应24小时。较高的反应温度，由于分子运动的加怜惜，反应时间缩短，这一点对分子含量较多的强阳性样本的测定没有问题，但对分子含量少的弱阳性样本则有漏检的可能。因此，我们建议在临床小鼠V-Myc骨髓细胞瘤病毒癌基因同源物(MYC)检测试剂盒测定中尽量使用较低温育温度较长反应时间的条件。

（3）“边缘效应”的排除。以前在使用96孔板的ELISA测定中，常发现有“边缘效应”，即外周孔显色较中心孔深，产生这种“边缘效应”的原因可能为 96孔板周孔与中心孔表面或热力学特征的不同。但有研究证实在温育中的热力学梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身为不良热导体，在实验室的常规 ELISA测定中，将板从室温（通常在25℃左右）置于37℃温箱，板也升温时，在外周孔与中心孔之间可能存在一热力学梯度。因此使用水浴或在将反应溶液加入至板孔中时，将板和溶液均加热至温育温度（如37℃），就可以很容易地排除“边缘效应”，并且可提高测定的重复性。

总而言之，在临床小鼠V-Myc骨髓细胞瘤病毒癌基因同源物(MYC)检测试剂盒测定中，要保证好的测定效果，可采用下述简单办法来确保温育条件，即尽量采用水浴，温育中让微孔板浮于水面上，或将浸透水的沙布放入一大饭盒中成一湿盒，放于温箱中，这样就会因为板条孔底部直接与37℃水或湿布的接触，以及水浴箱或湿盒内的高温度，而使反应溶液的温度迅速与温室平衡。

hzC049Hu 人磷脂酶D(PLD)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Phospholipase D (PLD) 

hzC077Hu 人层黏连蛋白α4(LAMα4)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Laminin Alpha 4 (LAMa4) 

hzC080Hu 人层粘连蛋白β2(LAMβ2)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Laminin Beta 2 (LAMb2) 

hzC097Hu 人整合素α11(ITGα11)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Integrin Alpha 11 (ITGa11) 

hzC169Hu 人神经秩蛋白(NRTN)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Neurturin (NRTN) 

hzC206Hu 人组蛋白脱乙酰基酶1(HDAC1)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Histone DeaHZtylase 1 (HDAC1) 

hzC260Hu 人融合蛋白(FUS)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Fusion (FUS) 

hzC270Hu 人7-脱氢胆固醇还原酶(DHCR7)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for 7-Dehydrocholesterol Reductase (DHCR7) 

hzC276Hu 人氨基酰化酶1(ACY1)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Aminoacylase 1 (ACY1) 

hzC281Hu 人腺苷激酶(ADK)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Adenosine Kinase (ADK) 

hzC295Hu 人无羊膜蛋白(AMN)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Amnionless (AMN) 

hzC304Hu 人Attractin蛋白(ATRN)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Attractin (ATRN) 

hzC340Hu 人胱天蛋白酶6(CASP6)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Caspase 6 (CASP6) 

hzC393Hu 人皮质醇稳定蛋白(CORT)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Cortistatin (CORT) 

hzC397Hu 人羧肽酶M(CPM)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Carboxypeptidase M (CPM) 

hzC411Hu 人肘臀蛋白(CUBN)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Cubilin (CUBN) 

hzC426Hu 人细胞球蛋白(CYGB)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Cytoglobin (CYGB) 

hzC480Hu 人脂筏特征蛋白2(FLOT2)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Flotillin 2 (FLOT2) 

hzC520Hu 人透明质酸合酶1(HAS1)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Hyaluronan Synthase 1 (HAS1) 

hzC551Hu 人Janus激酶1(JAK1)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Janus Kinase 1 (JAK1) 

hzC554Hu 人驱动蛋白2(KNS2)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Kinesin 2 (KNS2) 

hzC559Hu 人吻素1(KISS1)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Kisspeptin 1 (KISS1) 

hzC625Hu 人巯基丙酮酸硫转移酶(MPST)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Mercaptopyruvate Sulfurtransferase (MPST) 

hzC692Hu 人旋光蛋白(OPTC)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Opticin (OPTC) 

hzC754Hu 人网蛋白(PLEC)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Plectin (PLEC) 

hzC769Hu 人核糖体结合糖蛋白Ⅰ(RPN1)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Ribophorin I (RPN1) 

hzC821Hu 人硫嘌呤甲基转移酶(TPMT)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Thiopurine Methyltransferase (TPMT)