小鼠海藻糖酶(TREH)检测试剂盒

温育是小鼠海藻糖酶(TREH)检测试剂盒测定中影响测定成败最为关键的一个因素。小鼠海藻糖酶(TREH)检测试剂盒作为一种固相免疫测定，抗原抗体的结合反应在固相上进行，要使液相中的抗原或抗体与固相上的特异抗体或抗原完全结合，必须在一定的温度条件下反应一定的时间。温育所需时间与温度成反比，即温度越高，则所需时间相对较短。最为常用的温育温度有37℃和室温，其次是43℃和2～8℃。

温育这一步是临床小鼠海藻糖酶(TREH)检测试剂盒测定中最容易出现问题的步骤。通常目前国内ELISA商品试剂盒的反应温育时间为37℃ 30分钟～1小时，进口ELISA试剂盒则通常为37℃ 1～2小时才能有较完全的结合，低于1小时，可能会影响测定下限。因此，关于温育，在实际测定操作中一定要注意以下几点：

（1）要保证在设定的温度下有足够的反应时间。一般来说，加完样本和/或反应试剂后，将微孔板从室温拿至水浴箱或温箱中时，孔内温度从室温升至37℃，需要一定的时间，尤其是在室温比较低以及非水浴的状态下，这段升温时间可能还比较长，而在临床实验室中，很少有人注意这个问题，通常是将微孔板一放入温箱即开始计时，这样就很容易造成实际测定中温育时间不够，弱阳性样本测不出来的问题。曾有一地处南方的血站同行提出了一个问题，就是在每一年的冬季总有那么一个多月的时间，在做HBsAg测定的室内质控中，测定由卫生部临床检验中心供应的1 ng/ml弱阳性样本时，总是测不出来，不知原因为何？这可能就与南方冬天室内温度较低有关，此时微孔板转入温箱后37℃温育时间不够，以致弱阳性样本测定为阴性。因此，为保证37℃下足够的温育时间，小鼠海藻糖酶(TREH)检测试剂盒临床实验室可自行确定本实验室不同季节（不同室温下）微孔板从室温拿至温箱后需要多长时间孔内温度才能达到37℃，从而适当延长板条在温箱中的放置时间。具体的做法是，用一小温度计放置板孔反应溶液中测量观察即可。

（2）温育温度的选择。在有的ELISA试剂盒的说明书中，指出温育温度可有两种，例如，一种是37℃下1小时，另一种则为43℃下45分钟。从免疫测定的抗原抗体反应的本质来看，在较低的温度下反应较长的时间最为完全。如2～8℃下反应24小时。较高的反应温度，由于分子运动的加怜惜，反应时间缩短，这一点对分子含量较多的强阳性样本的测定没有问题，但对分子含量少的弱阳性样本则有漏检的可能。因此，我们建议在临床小鼠海藻糖酶(TREH)检测试剂盒测定中尽量使用较低温育温度较长反应时间的条件。

（3）“边缘效应”的排除。以前在使用96孔板的ELISA测定中，常发现有“边缘效应”，即外周孔显色较中心孔深，产生这种“边缘效应”的原因可能为 96孔板周孔与中心孔表面或热力学特征的不同。但有研究证实在温育中的热力学梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身为不良热导体，在实验室的常规 ELISA测定中，将板从室温（通常在25℃左右）置于37℃温箱，板也升温时，在外周孔与中心孔之间可能存在一热力学梯度。因此使用水浴或在将反应溶液加入至板孔中时，将板和溶液均加热至温育温度（如37℃），就可以很容易地排除“边缘效应”，并且可提高测定的重复性。

总而言之，在临床小鼠海藻糖酶(TREH)检测试剂盒测定中，要保证好的测定效果，可采用下述简单办法来确保温育条件，即尽量采用水浴，温育中让微孔板浮于水面上，或将浸透水的沙布放入一大饭盒中成一湿盒，放于温箱中，这样就会因为板条孔底部直接与37℃水或湿布的接触，以及水浴箱或湿盒内的高温度，而使反应溶液的温度迅速与温室平衡。

hzL222Hu 人自噬相关蛋白7(ATG7)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Autophagy Related Protein 7 (ATG7) 

hzB297Hu 人细胞绒毛蛋白(CVL)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Cytovillin (CVL) 

hzE405Hu 人Asc型氨基酸转运蛋白1(ASC1)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Asc Type Amino Acid Transporter 1 (ASC1) 

hzB929Hu 人胆碱乙酰转移酶(ChAT)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Choline AHZtyltransferase (ChAT) 

hzB685Hu 人整合素αM(ITGαM)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Integrin Alpha M (ITGaM) 

hzW958Hu 人糖抗原19-5(CA19-5)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Carbohydrate Antigen 19-5 (CA19-5) 

hzB680Hu 人朊病毒蛋白(PRNP)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Prion Protein (PRNP) 

hzB661Hu 人柠檬酸合酶(CS)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Citrate Synthase (CS) 

hzM983Hu 人尿嘧啶磷酸核糖转移酶(UPRT)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Uracil Phosphoribosyltransferase (UPRT) 

hzB636Hu 人肽基脯氨酰异构酶C(PPIC)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Peptidylprolyl Isomerase C (PPIC) 

hzP124Hu 人70kDa热休克蛋白12B(HSPA12B)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Heat Shock 70kDa Protein 12B (HSPA12B) 

hzB534Hu 人趋化因子C-C-基元受体1(CCR1)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Chemokine C-C-Motif ReHZptor 1 (CCR1) 

hzP692Hu 人SH3域结合谷氨酸丰富蛋白样蛋白(SH3BGRL)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for SH3 Domain Binding Glutamic Acid Rich Protein Like Protein (SH3BGRL) 

hzQ889Hu 人Ig样域蛋白粘附分子1(AMIGO1)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Adhesion Molecule With Ig Like Domain Protein 1 (AMIGO1) 

hzR982Hu 人PP2A癌症抑制抑制因子(CIP2A)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for CanHZrous Inhibitor Of PP2A (CIP2A) 

hzS809Hu 人mRNA加帽蛋白增强子1(EDC1)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for EnhanHZr Of mRNA Decapping Protein 1 (EDC1) 

hzC629Hu 人甲硫氨酸亚砜还原酶A(MSRA)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Methionine Sulfoxide Reductase A (MSRA) 

hzC200Hu 人早老素1(PSEN1)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Presenilin 1 (PSEN1) 

hzC189Hu 人肾上腺素能受体β激酶1(ADRβK1)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Adrenergic ReHZptor Beta Kinase 1 (ADRbK1) 

hzC676Hu 人神经降压素受体2(NTSR2)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Neurotensin ReHZptor 2 (NTSR2) 

hzA993Hu 人促微管蛋白聚合蛋白(TPPP)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Tubulin Polymerization Promoting Protein (TPPP) 

hzA546Hu 人抗IgA抗体(Anti-IgA)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Anti-IgA Antibody 

hzB029Hu 人整合素α2B(ITGα2B)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Integrin Alpha 2B (ITGa2B) 

hzB114Hu 人中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Neutrophil Alkaline Phosphatase (NAP) 

hzB253Hu 人脯氨酰羧肽酶(PRCP)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Prolylcarboxypeptidase (PRCP) 

hzB424Hu 人β-促脂素(βLPH)检测试剂盒说明书 ELISA Kit for Beta-Lipotropic Hormone (bLPH)