人破伤风抗体(Tetanus Ab)ELISA试剂盒中加样须注意如下问题:
1. 吸取样品时,加样枪吸头不应黏附多余的液体;加样时不可90度向孔中滴加液体,这样会导致液体残留在吸头上,加样不准确!
2. 不要将吸头伸入孔中,一方面若接触孔底可能压弯吸头,另一方面可能会将孔中的液体吹起来,加样不准确!
正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁加入,应注意:
1. 角度太小,会使液体残留在孔壁上,导致加样不准确!
2. 吸头应当贴着管壁和液面的交界处!
在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或粉剂,临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15~30分钟。从理论上说,37℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全,尽管在最初的10分钟内,人破伤风抗体(Tetanus Ab)ELISA试剂盒绝大部份催化反应即可完成。因此,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37℃下反应25~30分钟后,终止反应比色测定。
此外,在加入底物开始显色反应前,最好是先检查一下底物溶液的有效性,即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppendorf管中,观察是否有显色出现,如有,则说明底物已变质。以OPD为底物,配好后应为无色,否则就不能使用。以TMB为底物,整个显色反应过程无需避光,而以OPD为底物,则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后,加入酸终止反应,振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。
1.3 正态分布及标准差 ELISA试验中,检验同一样本达20次以上时,就会发现这组数据(指测定结果的吸光值)人破伤风抗体(Tetanus Ab)ELISA试剂盒分布在均值两侧,大部分集中在均值附近。如果以测定值为横坐标,以出现的频率为纵坐标作图,就可绘出一个呈钟形的曲线图。如图5-1,钟顶处为均值,其他值以均值为中心对称分布,这就是正态分布。 正态曲线以下的面积称概率,常用样本的均数(X)和标准差(SD)来表示,其计算方法如下: 均值、标准差和概率的关系如下: X±1SD,概率0.68 X±2SD,概率0.95 X±3SD,概率0.99 换言之,当ELSIA检测同一样本达一定次数后所得的一组数据,其中靠近均值(X)的±1SD范围内的数据,占该组数据的68%,在X±2SD范围内分布的数据占总体的95%,在X±3SD范围内分布的数据占总体的99%。当我们要求检验结果在X±2SD范围内为合格时,将有95%的数据可能合格。
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条
件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。
本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试
剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出
准确的结果。
人破伤风抗体(Tetanus Ab)ELISA试剂盒相关产品系列表:
HZJ784Mu 小鼠琥珀酸脱氢酶复合体A亚基(SDHA)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Succinate Dehydrogenase Complex Subunit A (SDHA)
HZK213Mu 小鼠琥珀酸脱氢酶复合体C亚基(SDHC)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Succinate Dehydrogenase Complex Subunit C (SDHC)
HZK214Mu 小鼠琥珀酸脱氢酶复合体D亚基(SDHD)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Succinate Dehydrogenase Complex Subunit D (SDHD)
HZC129Mu 小鼠组织内转化生长因子β结合蛋白1(LTBP1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Latent Transforming Growth Factor Beta Binding Protein 1 (LTBP1)
HZC826Mu 小鼠高亲和力神经降压素受体1(NTSR1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Neurotensin Receptor 1, High Affinity (NTSR1)
HZG799Mu 小鼠精脒/精胺N1-乙酰基转移酶1(SAT1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Spermidine/Spermine N1-Acetyltransferase 1 (SAT1)
HZB604Mu 小鼠生长调节致癌基因γ(GROγ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Growth Regulated Oncogene Gamma (GROg)
HZC419Mu 小鼠Catheli抗菌肽(CAMP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cathelicidin Antimicrobial Peptide (CAMP)
HZC883Mu 小鼠突触蛋白Ⅰ(SYN1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Synapsin I (SYN1)
HZH314Mu 小鼠cGMP依赖性蛋白激酶Ⅰ(PRKG1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Protein Kinase, cGMP Dependent Type I (PRKG1)
HZG543Mu 小鼠磷脂酰乙醇胺结合蛋白1(PEBP1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Phosphatidylethanolamine Binding Protein 1 (PEBP1)
HZG945Mu 小鼠泛素羧基端酯酶L1(UCHL1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Ubiquitin Carboxyl Terminal Hydrolase L1 (UCHL1)
HZB217Mu 小鼠透明质酸酶(HAase)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Hyaluronidase (HAase)
HZE582Mu 小鼠B-细胞淋巴瘤因子2样蛋白(Bcl2L)ELISA试剂盒 ELISA Kit for B-Cell CLL/Lymphoma 2 Like Protein (Bcl2L)
HZK541Mu 小鼠再生胰岛衍生蛋白1β(REG1β)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Regenerating Islet Derived Protein 3 Beta (REG3b)
HZA310Mu 小鼠载脂蛋白H(APOH)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Apolipoprotein H (APOH)
HZC231Mu 小鼠蛋白激酶Bα(PKBα)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Protein Kinase B Alpha (PKBa)
HZH115Mu 小鼠丝氨酸/苏氨酸激酶11(STK11)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Serine/Threonine Kinase 11 (STK11)
CEA830Mu 小鼠促卵泡素(FSH)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Follicle Stimulating Hormone (FSH)
HZM131Mu 小鼠抵抗素样蛋白β(RETNLβ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Resistin Like Beta (RETNLb)
HZA530Mu 小鼠纤维蛋白原降解产物(FDP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Fibrinogen Degradation Product (FDP)
HZA352Mu 小鼠可卡因安非他明调节转录肽(CART)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cocaine And Amphetamine Regulated Transcript (CART)
HZA528Mu 小鼠血小板衍生生长因子A(PDGFA)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Platelet Derived Growth Factor Subunit A (PDGFA)
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