人幽门螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA试剂盒中加样须注意如下问题:
1. 吸取样品时,加样枪吸头不应黏附多余的液体;加样时不可90度向孔中滴加液体,这样会导致液体残留在吸头上,加样不准确!
2. 不要将吸头伸入孔中,一方面若接触孔底可能压弯吸头,另一方面可能会将孔中的液体吹起来,加样不准确!
正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁加入,应注意:
1. 角度太小,会使液体残留在孔壁上,导致加样不准确!
2. 吸头应当贴着管壁和液面的交界处!
在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或粉剂,临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15~30分钟。从理论上说,37℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全,尽管在最初的10分钟内,绝大部份催化反应即可完成。因此,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37℃下反应25~30分钟后,终止反应比色测定。
此外,人幽门螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA试剂盒在加入底物开始显色反应前,最好是先检查一下底物溶液的有效性,即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppendorf管中,观察是否有显色出现,如有,则说明底物已变质。以OPD为底物,配好后应为无色,否则就不能使用。以TMB为底物,整个显色反应过程无需避光,而以OPD为底物,则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后,加入酸终止反应,振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。
1.3 正态分布及标准差 ELISA试验中,检验同一样本达20次以上时,就会发现这组数据(指测定结果的吸光值)分布在均值两侧,大部分集中在均值附近。如果以测定值为横坐标,以出现的频率为纵坐标作图,就可绘出一个呈钟形的曲线图。如图5-1,钟顶处为均值,其他值以均值为中心对称分布,人幽门螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA试剂盒这就是正态分布。 正态曲线以下的面积称概率,常用样本的均数(X)和标准差(SD)来表示,其计算方法如下: 均值、标准差和概率的关系如下: X±1SD,概率0.68 X±2SD,概率0.95 X±3SD,概率0.99 换言之,当ELSIA检测同一样本达一定次数后所得的一组数据,其中靠近均值(X)的±1SD范围内的数据,占该组数据的68%,在X±2SD范围内分布的数据占总体的95%,在X±3SD范围内分布的数据占总体的99%。当我们要求检验结果在X±2SD范围内为合格时,将有95%的数据可能合格。
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条
件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。
本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试
剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出
准确的结果。
人幽门螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA试剂盒相关产品系列表:
HZB503Hu 人肌营养不良蛋白(DMD)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Dystrophin (DMD)
HZA979Hu 人亲环素A(CYPA)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cyclophilin A (CYPA)
HZB513Hu 人烟碱型胆碱受体β2(CHRNβ2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cholinergic Receptor, Nicotinic, Beta 2 (CHRNb2)
HZB514Hu 人白介素1受体关联激酶1(IRAK1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interleukin 1 Receptor Associated Kinase 1 (IRAK1)
HZB517Hu 人颗粒溶素(GNLY)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Granulysin (GNLY)
HZB518Hu 人白介素1受体关联激酶4(IRAK4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interleukin 1 Receptor Associated Kinase 4 (IRAK4)
HZB520Hu 人白介素1受体关联激酶3(IRAK3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interleukin 1 Receptor Associated Kinase 3 (IRAK3)
HZB521Hu 人黏膜地址素细胞黏附分子(MAdCAM1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Mucosal Addressin Cell Adhesion Molecule 1 (MAdCAM1)
HZB522Hu 人肺部激活调节趋化因子(PARC)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Pulmonary Activation Regulated Chemokine (PARC)
HZB532Hu 人维甲酸诱导基因1蛋白(RIG1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Retinoic Acid Inducible Gene 1 Protein (RIG1)
HZB537Hu 人丝氨酸蛋白酶2(PRSS2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Protease, Serine 2 (PRSS2)
HZB539Hu 人血清淀粉样P物质(SAP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Serum Amyloid P Component (SAP)
HZB542Hu 人甘露糖受体C1(MRC1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Mannose Receptor C Type 1 (MRC1)
HZB547Hu 人吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Indoleamine-2,3-Dioxygenase (IDO)
HZB559Hu 人丝切蛋白1(CFL1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cofilin 1, Non Muscle (CFL1)
HZB560Hu 人淋巴毒素β(LTβ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Lymphotoxin Beta (LTb)
HZB564Hu 人干扰素调节因子1(IRF1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interferon Regulatory Factor 1 (IRF1)
HZB568Hu 人血小板因子4V1(PF4V1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Platelet Factor 4 Variant 1 (PF4V1)
HZB570Hu 人粒细胞趋化蛋白2(GCP2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Granulocyte Chemotactic Protein 2 (GCP2)
HZB578Hu 人IgG-Fc片段受体Ⅰ(FcγRⅠ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Receptor I For The Fc Region Of Immunoglobulin G (FcgRI)
HZB579Hu 人IgG-Fc片段受体Ⅱ(FcγRⅡ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Receptor II For The Fc Region Of Immunoglobulin G (FcgRII)
HZB582Hu 人IgE-Fc片段受体Ⅱ(FcεRⅡ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Receptor II For The Fc Region Of Immunoglobulin E (FceRII)
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