人Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA试剂盒中加样须注意如下问题:
1. 吸取样品时,加样枪吸头不应黏附多余的液体;加样时不可90度向孔中滴加液体,这样会导致液体残留在吸头上,加样不准确!
2. 不要将吸头伸入孔中,一方面若接触孔底可能压弯吸头,另一方面可能会将孔中的液体吹起来,加样不准确!
正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁加入,应注意:
1. 角度太小,会使液体残留在孔壁上,导致加样不准确!
2. 吸头应当贴着管壁和液面的交界处!
在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或粉剂,临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15~30分钟。从理论上说,37℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全,尽管在最初的10分钟内,绝大部份催化反应即可完成。因此,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37℃下反应25~30分钟后,终止反应比色测定。
此外,人Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA试剂盒在加入底物开始显色反应前,最好是先检查一下底物溶液的有效性,即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppendorf管中,观察是否有显色出现,如有,则说明底物已变质。以OPD为底物,配好后应为无色,否则就不能使用。以TMB为底物,整个显色反应过程无需避光,而以OPD为底物,则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后,加入酸终止反应,振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。
1.3 正态分布及标准差 ELISA试验中,检验同一样本达20次以上时,就会发现这组数据(指测定结果的吸光值)分布在均值两侧,大部分集中在均值附近。如果以测定值为横坐标,以出现的频率为纵坐标作图,就可绘出一个呈钟形的曲线图。如图5-1,钟顶处为均值,其他值以均值为中心对称分布,这就是正态分布。 正态曲线以下的面积称概率,常用样本的均数(X)和标准差(SD)来表示,其计算方法如下: 均值、标准差和概率的关系如下: X±1SD,概率0.68 X±2SD,概率0.95 X±3SD,人Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA试剂盒概率0.99 换言之,当ELSIA检测同一样本达一定次数后所得的一组数据,其中靠近均值(X)的±1SD范围内的数据,占该组数据的68%,在X±2SD范围内分布的数据占总体的95%,在X±3SD范围内分布的数据占总体的99%。当我们要求检验结果在X±2SD范围内为合格时,将有95%的数据可能合格。
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条
件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。
本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试
剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出
准确的结果。
人Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA试剂盒相关产品系列表:
hz-E12222 大鼠柠檬酸合酶(CS)ELISA试剂盒 Rat Citrate synthase,CS ELISAkit
hz-E12223 大鼠L-鼠乳酸脱氢酶(L-LDH) ELISA试剂盒 Rat L-Lactate Dehydrogenase,L-LDH ELISAkit
hz-E12224 大鼠脂酰辅酶A合成酶(ACS)ELISA试剂盒 Rat Fatty acyl-CoA synthetase,ACS ELISAkit
hz-E12225 大鼠肉毒碱脂酰转移酶(CACT)ELISA试剂盒 Rat carnitine-acylcarnitine translocase,CACT ELISAkit
hz-E12226 大鼠磷酸化乙酰辅酶A羧化酶(pACCase)ELISA试剂盒 Rat Phosphorylated acetyl-CoA catboxylase,pACCase ELISAkit
hz-E12227 大鼠金属硫蛋白(MT)ELISA试剂盒 Rat Metallothionein,MT ELISAkit
hz-E12228 大鼠心肌特异性肌钙蛋白T(cTnT)ELISA试剂盒 Rat cardiac isoform of Tropnin T,cTnT ELISAkit
hz-E12229 大鼠乙酰胆碱酯酶(AChE)ELISA试剂盒 Rat Acetylcholinesterase,AChE ELISAkit
hz-E12230 大鼠糖缺失性转铁蛋白(CDT)ELISA试剂盒 Rat carbohydrate-deficient transferrin,CDT ELISAkit
hz-E12231 大鼠总胆汁酸(TBA)ELISA试剂盒 Rat Total bile acide,TBA ELISAkit
hz-E12232 大鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA试剂盒 Rat β2-microglobulin,BMG/β2-MG ELISAkit
hz-E12233 大鼠视黄醇结合蛋白(RBP)ELISA试剂盒 Rat Retinol-binding protein,RBP ELISAkit
hz-E12234 大鼠促性腺激素释放激素受体抗体(GNRHR-Ab)ELISA试剂盒 Rat anti-gonadotropin-releasing hormone receptor antibody,GNRHR-Ab ELISAkit
hz-E12235 大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶(ADAMTS13/vWF-cp)ELISA试剂盒 Rat von Willebrand Factor cleaving protease,ADAMTS-13/vWF-cp ELISAkit
hz-E12236 大鼠主要碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒 Rat major basic protein,MBP ELISAkit
hz-E12237 大鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)ELISA试剂盒 Rat eosinophil cationic protein,ECP ELISAkit
hz-E12238 大鼠钙调磷酸酶(CaN)ELISA试剂盒 Rat calcineurin,CaN ELISAkit
hz-E12239 大鼠抑制素结合蛋白(INHBP)ELISA试剂盒 Rat Inhibin binding protein,INHBP ELISAkit
hz-E12240 大鼠抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)ELISA试剂盒 Rat anti-Thyroid-Peroxidase antibody,TPO-Ab ELISAkit
hz-E12241 大鼠凋亡诱导因子(AIF)ELISA试剂盒 Rat apoptosis inducing factor,AIF ELISAkit
hz-E12242 大鼠抗双链DNA抗体/天然DNA抗体(dsDNA)ELISA试剂盒 Rat anti-double stranded DNA,dsDNA ELISAkit
hz-E12243 大鼠碱性磷酸酶(ALP)ELISA试剂盒 Rat alkaline phosphatase,ALP ELISAkit
hz-E12244 大鼠血管生成素4(ANG-4)ELISA试剂盒 Rat Angiopoietin 4,ANG-4 ELISAkit
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