人巨噬细胞趋化因子(MCF)ELISA试剂盒中加样须注意如下问题:
1. 吸取样品时,加样枪吸头不应黏附多余的液体;加样时不可90度向孔中滴加液体,这样会导致液体残留在吸头上,加样不准确!
2. 不要将吸头伸入孔中,一方面若接触孔底可能压弯吸头,另一方面可能会将孔中的液体吹起来,加样不准确!
正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁加入,应注意:
1. 角度太小,会使液体残留在孔壁上,导致加样不准确!
2. 吸头应当贴着管壁和液面的交界处!
在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或粉剂,临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15~30分钟。从理论上说,37℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全,尽管在最初的10分钟内,绝大部份催化反应即可完成。因此,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37℃下反应25~30分钟后,终止反应比色测定。
此外,人巨噬细胞趋化因子(MCF)ELISA试剂盒在加入底物开始显色反应前,最好是先检查一下底物溶液的有效性,即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppendorf管中,观察是否有显色出现,如有,则说明底物已变质。以OPD为底物,配好后应为无色,否则就不能使用。以TMB为底物,整个显色反应过程无需避光,而以OPD为底物,则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后,加入酸终止反应,振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。
1.3 正态分布及标准差 ELISA试验中,检验同一样本达20次以上时,就会发现这组数据(指测定结果的吸光值)分布在均值两侧,大部分集中在均值附近。如果以测定值为横坐标,以出现的频率为纵坐标作图,就可绘出一个呈钟形的曲线图。如图5-1,钟顶处为均值,其他值以均值为中心对称分布,这就是正态分布。 正态曲线以下的面积称概率,常用样本的均数(X)和标准差(SD)来表示,其计算方法如下: 均值、标准差和概率的关系如下: X±1SD,概率0.68 X±2SD,概率0.95 X±3SD,概率0.99 换言之,当ELSIA检测同一样本达一定次数后所得的一组数据,其中靠近均值(X)的±1SD范围内的数据,占该组数据的68%,在X±2SD范围内分布的数据占总体的95%,人巨噬细胞趋化因子(MCF)ELISA试剂盒在X±3SD范围内分布的数据占总体的99%。当我们要求检验结果在X±2SD范围内为合格时,将有95%的数据可能合格。
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条
件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。
本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试
剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出
准确的结果。
人巨噬细胞趋化因子(MCF)ELISA试剂盒相关产品系列表:
hz-E11211 人协同刺激分子受体(CMR)ELISA试剂盒 Human costimulatory molecules recptor,CMR ELISAkit
hz-E11212 人肽聚糖(PG)ELISA试剂盒 Human peptidoglycan,PG ELISAkit
hz-E11213 人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)ELISA试剂盒 Human Lipoarabinomannan,LAM ELISAkit
hz-E11214 人甘露糖(MN)ELISA试剂盒 Human Mannose,MN ELISAkit
hz-E11215 人甘露糖受体(MR)ELISA试剂盒 Human mannose receptor,MR ELISAkit
hz-E11216 人未甲基化寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN)ELISA试剂盒 Human CpG oligodeoxynucleotide,CpG-ODN ELISAkit
hz-E11217 人甲酰甲硫氨酸(fMet)ELISA试剂盒 Human formylmethionine,fMet ELISAkit
hz-E11218 人ICE蛋白酶激活因子(IRAP)ELISA试剂盒 Human ICE protease-activating factor,IRAP ELISAkit
hz-E11219 人非甲基化寡核苷酸(NON)ELISA试剂盒 Human nonmethylated oligonucleotide,NON ELISAkit
hz-E11220 人蛋白Z(Protein Z)ELISA试剂盒 Human Protein Z ELISAkit
hz-E11221 人蛋白S(Protein S)ELISA试剂盒 Human Protein S ELISAkit
hz-E11222 人可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)ELISA试剂盒 Human soluble endothelial protein C receptor,sEPCR ELISAkit
hz-E11223 人CCAAT增强子结合蛋白ε(C/EBPε)ELISA试剂盒 Human CCAAT/enhancer binding protein epsilon,C/EBPε ELISAkit
hz-E11224 人CCAAT增强子结合蛋白δ(C/EBPδ)ELISA试剂盒 Human CCAAT/enhancer binding protein deta,C/EBPδ ELISAkit
hz-E11225 人CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)ELISA试剂盒 Human CCAAT/enhancer binding protein alpha,C/EBPα ELISAkit
hz-E11226 人2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)ELISA试剂盒 Human 2,3-Disphosphoglycerate,2,3-DPG ELISAkit
hz-E11227 人基膜聚糖/内腔蛋白(LUM)ELISA试剂盒 Human lumican,LUM ELISAkit
hz-E11228 人Na+/H+交换体3(NHE3)ELISA试剂盒 Human Na+/H+ exchanger 3,NHE3 ELISAkit
hz-E11229 人孤腓肽(OFQ/N)ELISA试剂盒 Human orphanin FQ/nociceptin,OFQ/N ELISAkit
hz-E11230 人基质裂解素(ST1)ELISA试剂盒 Human Stromelysin-1,ST1 ELISAkit
hz-E11231 人基质裂解素(ST2)ELISA试剂盒 Human Stromelysin-2,ST2 ELISAkit
hz-E11232 人基质裂解素(ST3)ELISA试剂盒 Human Stromelysin-3,ST3 ELISAkit
hz-E11233 人脂氧素A4(LXA4)ELISA试剂盒 Human Lipoxin A4,LXA4 ELISAkit
hz-E11234 人蛋白酶3特异性抗中性粒细胞胞质抗体(PR3-ANCA)ELISA试剂盒 Human proteinase-antineutrophil cytoplasmic antibody,PR3-ANCA ELISAkit
hz-E11235 人β-促脂素(β-LPH)ELISA试剂盒 Human β-lipotropic hormone,β-LPH ELISAkit
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