在小鼠卵泡抑素样蛋白3(FSTL3)检测试剂盒中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值最大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。小鼠卵泡抑素样蛋白3(FSTL3)检测试剂盒然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。
实验原理
小鼠卵泡抑素样蛋白3(FSTL3)检测试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中
TLR水平。用纯化的抗体包被微孔
板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入
TLR抗原、生物素化的抗人
TLR抗体、HRP
标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下
转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的TLR呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。试剂盒组成及试剂配制
小鼠卵泡抑素样蛋白3(FSTL3)检测试剂盒相关如下:
ELISA Kit for Periplakin (PPL) 小鼠旁血小板溶蛋白(PPL)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Secretagogin (SCGN) 小鼠促泌素(SCGN)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Bactericidal/Permeability Increasing Protein 小鼠杀菌性/通透性增加蛋白(BPI)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Transient Receptor Potential 小鼠转化受体电位阳离子通道亚家族V成员1(TRPV1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Tryptophan Hydroxylase 2 (TPH2) 小鼠色胺酸羟化酶2(TPH2)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Podocan (PODN) 小鼠Podocan蛋白(PODN)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Matrix Extracellular Phosphoglycoprotein (MEPE) 小鼠细胞外基质磷酸糖蛋白(MEPE)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Phenol Sulfotransferase (PST) 小鼠苯酚磺基转移酶(PST)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Coagulation Factor VII (F7) 小鼠凝血因子Ⅶ(F7)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for N-Acetyltransferase 1 (NAT1) 小鼠N-乙酰转移酶1(NAT1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Monokine Induced By Interferon Gamma (MIg) 小鼠干扰素γ诱导单核因子(MIγ)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Lysyl Oxidase Like Protein 2 (LOXL2) 小鼠赖氨酰氧化酶样蛋白2(LOXL2)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Lysyl Oxidase Like Protein 1 (LOXL1) 小鼠赖氨酰氧化酶样蛋白1(LOXL1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Reelin (RL) 小鼠络丝蛋白(RL)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Indoleamine-2,3-Dioxygenase (IDO) 小鼠吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Sirtuin 1 (SIRT1) 小鼠沉默调节蛋白1(SIRT1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Heat Shock Protein Beta 8 (HSPb8) 小鼠热休克蛋白β8(HSPβ8)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Chemokine C-C-Motif Receptor 7 (CCR7) 小鼠趋化因子C-C-基元受体7(CCR7)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Integrin Alpha 3 (ITGa3) 小鼠整合素α3(ITGα3)检测试剂盒96t/48t
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