大鼠视网膜微血管内皮细胞
细胞原代培养原理和应用:
细胞原代培养是通过特殊分离方法从胚胎、组织器官以及外周血中分离获得单细胞,置于合适的培养基中培养,在无菌、适当温度和一定条件下,使细胞生存、生长和繁殖的过程。原代培养的“代”并非细胞的代数,是指细胞培养的次数,从体内取出组织接种培养到第一次传代的阶段,都属原代培养,一般持续1-4周。
大鼠视网膜微血管内皮细胞原代培养细胞直接来源于活体组织,体外培养也尽量模拟体内环境,使得分离得到的细胞接近生物体内的生活状态,可作为研究生物体细胞的生产、代谢、繁殖、凋亡提供有力手段,亦可用于各种药理作用、药物开发研究和临床实践。
原代细胞的质量取决于多个因素:取材、培养条件的优化、无菌操作,特别是组织分离技术等。对于大多数研究者而言,想要获得高质量的原代培养细胞仍然比较困难。尽管原代培养技术已较普遍,但是有时仍会得到一些难以解释的结果。公司拥有行政许可的洁净级实验动物中心,已构建细胞培养和实验平台,可分离培养数百种人、大小鼠和大型动物的原代细胞,并在此基础上提供相关细胞实验服务,包括细胞培养、细胞转染以及细胞药物刺激后各种增殖、侵染和凋亡实验。如果在细胞实验上有任何困难,即可联系我们,我们很乐意提供帮助。
细胞简介:
大鼠视网膜微血管内皮细胞分离自视网膜组织;视网膜居于眼球壁的内层,是一层透明的薄膜。视网膜由色素上皮层和视网膜感觉层组成,两层间在病理情况下可分开,称为视网膜脱离。色素上皮层与脉络膜紧密相连,由色素上皮细胞组成,它们具有支持和营养光感受器细胞、遮光、散热以及再生和修复等作用。组织学上视网膜分为10层,由外向内分别为:色素上皮层、视锥、视杆细胞层、外界膜、外颗粒层、外丛状层、内颗粒层、内丛状层、神经节细胞层、神经纤维层、内界膜。视网膜内层为衬于血管膜内面的一层薄膜,有感光作用;后部鼻侧有一视神经乳头。视网膜上的感觉层是由三个神经元组成。第一神经元是视细胞层,专司感光,它包括锥细胞和杆细胞。视杆细胞主要在离中心凹较远的视网膜上,而视锥细胞则在中心凹处最多。第二层叫双节细胞,约有10到数百个视细胞通过双节细胞与一个神经节细胞相联系,负责联络作用。第三层叫节细胞层,专管传导。视网膜是一层菲薄的但又非常复杂的结构,它贴于眼球的后壁部,传递来自视网膜感受器冲动的神经纤维跨越视网膜表面,经由视神经到达出口。视网膜的分辨力是不均匀的,在黄斑区,其分辨能力最强。它是组成血管腔面单层扁平上皮样细胞,它所产生和分泌的生物活性物质对维持血管张力、调节血压、抗血栓形成等有重要作用,在视网膜血管疾病的发病机制中有重要病理生理学意义。由于从不同的组织和器官获得的内皮细胞具有不同的特性,在脑和视网膜中,这些内皮细胞具有内屏障的功能,在调节血管生理状态,释放血管活性物质以及新生血管的形成中发挥着重要作用,体外分离培养RCEC对研究视网膜血管性疾病发生发展的病理生理机制以及疾病的早期防治具有重要临床意义。
商品属性:
产品名称 | 大鼠视网膜微血管内皮细胞 | 组织来源 | 视网膜组织 |
产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 生长特性 | 贴壁 |
细胞形态 | 内皮细胞样 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
方法简介:
公司实验室分离的大鼠视网膜微血管内皮细胞采用胶原酶-中性蛋白酶混合消化法结合密度梯度离心法、最后通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠视网膜微血管内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件 PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
注意事项:
① 细胞培养、传代以及冻存需要严格的无菌操作。
② 传代时需要适度的消化,消化的时间受消化液的种类、配制时间、加入培养瓶中的量等诸多因素的影响,消化过程中应该注意培养细胞形态的变化,一旦胞质回缩,连接变松散,或有成片浮起的迹象就要立即终止消化。
③ 传代应在细胞处于对数期、未达到汇合状态时进行。
④ 细胞冻存液需提前配制,不可直接将DMSO加入细胞悬液中。
⑤ 应选择汇合度80%-90%左右,并且活力达90%以上处于对数生长期时的细胞进行冻存操作,确保细胞冻存时状态最佳,冻存密度可根据细胞特性进行调整。
⑥ 程序冻存盒、细胞冻存液、完全培养基等试剂都要复温至室温备用。
⑦ 冻存前注意切勿消化时间过长、吹打力度过重、离心转速过大或离心时间过长,以免造成细胞损伤。
⑧ 冻存管的盖子一定要拧紧,否则水浴复苏时水会渗入造成污染。
⑨ 细胞不可长期保存在-80℃冰箱中,放置时间不要超过3天。
⑩ 液氮或冰箱距离细胞房较远,细胞需要放在干冰或冰盒上运送至细胞房。
公司正在出售的产品:
葡萄糖6磷(G6P)活性比色法检测试剂盒 | 大鼠甲状腺上皮细胞 |
生物碱含量活性比色法检测试剂盒 | 大鼠输卵管平滑肌细胞 |
大鼠雌激su受体(ER) ELISA检测试剂盒 | 大鼠成骨细胞 |
肉毒梭状芽孢杆菌D型外毒su基因PCR试剂盒 | 大鼠膈肌细胞 |
苯乙醇胺甲基转移mei封闭多肽 | 大鼠内皮祖细胞 |
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补体C3d片段封闭多肽 | 小鼠股动脉平滑肌细胞 |
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5色氨suan羟化mei2封闭多肽 | 小鼠肠巨噬细胞 |
鸡病毒性肠炎病毒(DEV)ELISA试剂盒 | 小鼠肾周肌成纤维细胞 |
人胰岛su样生长因子结合蛋白4(IGFBP-4)ELISA检测试剂盒 | 大鼠视网膜微血管内皮细胞小鼠海绵体平滑肌细胞 |
人转录因子E2F1 试剂盒ELISA | 小鼠zi宫微血管内皮细胞 |
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