大鼠冠状动脉平滑肌细胞
细胞简介:
大鼠冠状动脉平滑肌细胞分离自冠状动脉组织;冠状动脉是供给心脏血液的动脉,起于主动脉根部,分左右两支,行于心脏表面。采用Schlesinger等的分类原则,将冠状动脉的分布分为三型:右优势型、均衡型、左优势型。左右冠状动脉是升主动脉的第一对分支。左冠状动脉为一短干,发自左主动脉窦,经肺动脉起始部和左心耳之间,沿冠状沟向左前方行后,立即分为前室间支和旋支。前室间支沿前室间沟下行,旋支绕过心尖切迹至心的膈面与右冠状动脉的后室间支相吻合。它是构成冠状动脉壁的主要细胞成分,细胞膜上分布着多种离子通道,如电压依赖性Na+通道、多种Ca2+通道和K+通道;它们参与了静息电位的维持与细胞膜电位的复极化、超极化,调节血管平滑肌的收缩及舒张功能,此外动脉粥样硬化的发展也涉及冠状动脉平滑肌细胞增殖、炎症及凋亡等。因此,原代分离培养的冠状动脉平滑肌细胞,对研究生理和病理状态下离子通道及血管张力变化机制具有非常重要的作用。冠状动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。
方法简介:
公司实验室分离的大鼠冠状动脉平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠冠状动脉平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
商品属性:
产品名称 | 大鼠冠状动脉平滑肌细胞 | 组织来源 | 冠状动脉 |
产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 产品货号 | A01X1535 |
包装 | 瓶装 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
注意事项:
1)原代培养的分离细胞在初次接触体外环境时,虽然被分散成单个细胞,但它们之间的互相影响还是存在的, 而且这种影响对细胞能否存活是非常重要的。在这些细胞之间能产生一些促生长的活性物质, 使细胞彼此互相促进存活和生长。如果接种的细胞密度过低, 细胞之间的促生长作用很小, 虽然营养物质很充足, 也很难使细胞适应从体内的组织环境到被分散后进入独立生存环境的变化过程。 如果接种的细胞密度过大,会导致营养物质供应不足, 代谢废物积累较快需要经常换液和传代。
2)原代培养时初始培养在组织分散和分离细胞时细胞可能会受到严重的损伤。适当增大原代培养接种的细胞密度, 给培养的细胞提供更多的类似于在体内时细胞之间的相互作用, 会极大提高原代培养的细胞在体外存活率。待细胞适应体外环境后进行传代培养时再以较低的密度接种和培养。
3)由于细胞之间的相互的内在联系被打破,分离细胞在体外培养时经历的生存环境改变很大,在体外存活和生长的难度相应增加。 对于贴壁依赖性细胞来说,尽快使接种的细胞贴壁,是决定培养能否成功的关键。可以在接种后先将培养瓶置培养箱内培养 3h 到 5h,由于细胞悬液中带有少量培养液, 细胞即可以维持存活, 又可以很快接触到培养瓶底壁, 是细胞迅速黏附于底物,待细胞贴壁后,再补足培养液继续培养。
4)分离细胞培养法—悬浮型细胞培养。
公司正在出售的产品:
几丁质活性比色法检测试剂盒 | 人羊膜上皮细胞 |
酪氨解氨(TAL)活性比色法检测试剂盒 | 人小胶质细胞 |
大鼠白介su1α(IL-1α) ELISA检测试剂盒 | 大鼠主动脉外膜成纤维细胞 |
小反刍兽疫病毒疫苗株RT-PCR试剂盒 | 小鼠胸主动脉平滑肌细胞 |
氧化meiIV亚型1封闭多肽 | 大鼠肝间质细胞 |
16号染色体开放阅读框20封闭多肽 | 大鼠前列腺上皮细胞 |
组蛋白赖氨suanN-甲基SETMAR封闭多肽 | 大鼠胰腺导管上皮细胞 |
17号染色体开放阅读框64封闭多肽 | 大鼠zi宫内膜基质细胞 |
可溶性E选择su封闭多肽 | 大鼠前脂肪细胞 |
蛋白mei体激活因子PA28γ封闭多肽 | 大鼠椎体终板软骨干细胞 |
磷suan化结蛋白封闭多肽 | 大鼠脑膜细胞 |
富含半蛋白1封闭多肽 | 大鼠嗅鞘细胞 |
猪白介su6(IL-6)试剂盒elisa | 大鼠巩膜上皮细胞 |
人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体4(TRAIL-R4)ELISA试剂盒 | 大鼠冠状动脉平滑肌细胞小鼠肺动脉平滑肌细胞 |
鸡血小板因子4(PF-4/CXCL4)检测试剂盒elisa | 小鼠腹腔主动脉平滑肌细胞 |
操作过程:
1)制备细胞悬浊液,计数并用培养液调整细胞密度。
2)在培养皿中加入足够的培养液。
3)将欲接种的细胞接种到培养器皿中。
4)在培养皿内放入一个有聚四氟乙烯包被的磁棒。将培养皿封口,送入恒温箱内。在磁力搅拌器上边搅拌边培养。若接种培养瓶或试管中,封口后可将培养器皿固定在恒温摇床上,边摇动边培养,无需放置磁棒。有些细胞也可以不用磁棒或磁力搅拌器,也不必使用恒温摇床,接种于预先用硅脂包被的培养器皿内直接在培养箱中静置培养即可。
5)培养液略呈黄色换液。吸出部分旧培养液,加入新鲜培养液即可。
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