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KASUMI-1人红白血病细胞

供货周期: 现货
品牌: 抚生
规格: 1×106
货号: A01X806
CAS号:
报价: ¥1800
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产品介绍

其它参数

种属:人
产品分类:人细胞系
细胞形态:原粒细胞
生长特性:悬浮生长
用途:仅供科研研究实验

商品属性:
2.png

产品名称

KASUMI-1人红白血病细胞

鉴定

STR鉴定

种属

货号

A01X806

温度

液氮

细胞形态

原粒细胞

英文名称

KASUMI-1:KASUMI1

生长特性

悬浮生长

细胞详情:
2.png

细胞别称:KASUMI-1; Kasumi 1; KASUMI1; Kasumi1;人急性淋巴白血病细胞;人急性原粒细胞白血病细胞;人急性髓母白血病细胞

种属来源:人

年龄性别:7岁,男

组织来源:外周血,急性原粒细胞白血病

生长特性:悬浮生长

细胞形态:原粒细胞

背景简介:Kasumi-1细胞具有人急性淋巴白血病细胞的典型特征,是研究人急性淋巴白血病的极佳材料。Kasumi-1细胞是一个带有8:21号染色体转位的白血病细胞株,这个转位使得AML1基因和ETO(或称MTG8)基因串联,使融合基因AML1-ETO(也称作AML1-MTG或RUNX1-CBF2T1)的表达升高,因而细胞产生嵌合的AML1-ETO蛋白。这个蛋白下调CEBPA mRNA、蛋白和DNA的结合活性,而这种结合对粒性白细胞的分化是极端重要的。Kasumi-1细胞建立于一位急性白血病患者的外周血,Kasumi-1细胞髓过氧化物酶阳性,显示其髓性成熟的形态。增生试验显示,培养的Kasumi-1细胞对IL-3、IL-6、G-CSF(粒细胞集落刺激因子)、GM-CS(粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子)有响应,但对IL-1和IL-5没有响应。在体外液体培养中分别加入二甲亚砜、G-CSF、IL-5,也没有观察到粒性或嗜酸性细胞的成熟。Kasumi-1细胞培养过程中,加入佛波酯可以看到诱导出的巨噬细胞样细胞。

生物安全等级:1

细胞规格:1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装

支原体检测:无

基因表达情况:

保藏机构:ATCC; CRL-2724 DSMZ; ACC-220

培养基:RPMI-1640+20% FBS+1%GlutaMAX-1谷氨酰胺+1%Sodium Pyruvate丙酮酸钠+PS

培养条件:气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃

冻存条件:无血清冻存液,液氮储存

倍增时间:~48-72 hours

STR鉴定位点Amelogenin:X,Y;D5S818: 9,11;D13S317: 11,13;D7S820: 8,11;D16S539: 9,12;vWA: 14;THO1: 6,9;Amelogenin: X;TPOX: 8,9;CSF1PO: 10,12

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细胞处理:

2.png
1) 冻存细胞的复苏:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于贴壁细胞传代可以参考以下方法:

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。 

3. 轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

3)细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

下面T25瓶为例;

1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.

2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。

3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。

细胞系操作步骤:

2.png

(1) 细胞系培养:取6cm细胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105个细胞培养液,37℃ CO2培养密度至40%~60%,密度过大,转染后不利筛选细胞。

(2) 转染液制备:在EP管中制备以下两液(为转染每一个孔细胞所用的量)

A液:用不含血清培养基稀释1ug 质粒DNA。

B液:用不含血清培养基稀释2ul脂质体。

分别将A液与B液轻弹混匀,静置5分钟。

(3) 吸取B液加入至A液中,轻弹混匀。室温中置10-15分钟。

(4) 转染准备:用1mL不含血清培养液漂洗两次,再加入4mL不含血清培养液。

(5) 转染:把A/B复合物缓缓加入培养液中,摇匀,37℃温箱置6~24小时,吸除无血清转染液,换入正常培养液继续培养。

(6) 瞬时转染后,可在48h-72h细胞长满之后,提取细胞蛋白或者RNA,验证敲减/过表达效率。

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KASUMI-1人红白血病细胞信息由上海抚生实业有限公司为您提供,如您想了解更多关于KASUMI-1人红白血病细胞报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。除供应KASUMI-1人红白血病细胞外,上海抚生实业有限公司还可为您提供IOWA-1T人乳腺癌细胞、Huh7.5人肝癌细胞、JC 小鼠乳腺癌细胞等产品,公司有专业的客户服务团队,是您值得信赖的合作伙伴。
工商信息

企业名称

上海抚生实业有限公司

企业信息已认证

企业类型

有限责任公司(自然人投资或控股)

信用代码

91310112594767988Q

成立日期

2012-05-02

注册资本

人民币550.0000万元整

经营范围

化工产品(除危险化学品、监控化学品、烟花爆竹、民用爆炸物品、易制毒化学品)、陶瓷制品、布艺制品、工艺品(象牙及其制品除外),酒店设备、一类医疗器械、实验室设备的销售,从事生物科技领域内的技术开发、技术转让、技术咨询、技术服务,电子商务(不得从事金融业务),商务咨询,保洁服务.[依法须经批准的项目,经相关部门批准后方可开展经营活动)

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