D283 Med人脑髓母细胞瘤细胞

D283 Med人脑髓母细胞瘤细胞

商品介绍：

生长特性 半贴半悬

细胞形态 上皮细胞样

生长培养基 MEM（含NEAA）＋10% FBS＋1% P/S

冻存条件

冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

温度：液氮

培养条件

气相：空气，95%；CO₂，5%

温度：37℃

推荐传代比例 1:2-1:4

推荐换液频率 2~3次/周

背景描述 D283 Med细胞是由Frien等人于1985年建系，源自一名6岁患有神经管细胞瘤有腹腔转移的白人男性小孩的腹水细胞。

年龄（性别） 男；6岁

组织来源 脑组织

细胞类型 肿瘤细胞

肿瘤类型 成髓瘤细胞

生物安全等级 1

倍增时间 ~52 hours

致瘤性 Yes, in nude mice(The cells form serially transplantable intercranial and subcutaneous tumors.)Yes, in soft agar

基因表达情况 The cells produce tumors in nude mice and the resulting tumors are glutamine synthetase positive; neuron specific enolase positive; glial fibrillary acidic proteins negative; S100 (S-100) protein negative; The cells express elevated levels of four biochemical markers of SCLC (neuron specific enolase; the brain isoenzyme of creatine kinase; L-DOPA decarboxylase; bombesin-like immunoreactivity)

保藏机构 ATCC; HTB-185IZSLER; BS TCL 203KCB; KCB 2010201YJ

细胞培养的步骤：

细胞培养前的准备：

细胞变质的征象包括核周出现颗粒、细胞与基质解离以及细胞质空泡形成。

这些变质征象可能为多种原因所致，例如：培养物污染、细胞系衰老或培养基中存在毒性物质，或者这些征象仅表明培养物需要更换培养基。

变质严重时将会成为不可逆的变化。

细胞培养通风橱的消毒及布局

保持细胞培养通风橱内的整洁有序，将所有物品置于直视范围内。

向放入通风橱内的所有物品喷洒70%乙醇，擦拭清洁进行消毒。

在通风橱中部开阔处放置细胞培养容器；移液器置于右前方易于取用；试剂和培养基置于右后方便于吸取；试管架置于中后部；小型容器置于左后部用于盛放废液。

培养瓶/皿等物品的无菌操作

细胞培养污染物主要分为两类：

化学污染物,如培养基、血清和水中的杂质、内毒素、增塑剂和去污剂。

生物污染物，如细菌、霉菌、酵母、病毒、支原体以及其他细胞系的交叉污染。

可通过充分了解污染源以及采用良好的无菌技术，降低污染发生的频率和严重程度。

细胞系要求及注意事项：

实验中建立细胞系有以下要求：

1、组织来源：

细胞供体所属物种，来自人体或者动物；

个体性别、年龄；取材的器官或组织。

如系肿瘤组织，应说明临床和病理诊断，以及病li号等。

2、细胞生物学检测：

了解细胞一般和特殊的生物学性状，如细胞一般形态，特异结构，细胞生长曲线和分裂指数，倍增时间，接种率等。

如为肿瘤细胞，为说明来源于原肿瘤组织并保持恶性，须做软琼脂培养，异体接种致瘤和对正常组织侵润力等实验。

3、培养条件和方法：

应说明细胞系（或株）适应的生存环境，即指明使用的培养基、血清种类、用量以及适宜PH值。

实验中建立细胞系需要注意事项：

1. 细胞的来源和健康程度需要保证，不能使用受到污染或者有疾病的细胞。

2. 实验室需要保持清洁和卫生，定期进行消毒，以避免细胞受到感染。

3. 细胞需要充足的营养和生长因子，以促进其生长和繁殖。

4. 温度和湿度的控制对于细胞的生长也非常重要，实验室需要有恒温恒湿设备。

5. 实验室需要配备各种安全设备，例如防火设备、急救箱等，保证实验的顺利进行和人员的安全。
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