核酸非变性PAGE上样液

核酸非变性PAGE上样液实验要点 

1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。  

2．在最适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。 

3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用苯酚和氯仿的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的异戊醇（苯酚—氯仿—异戊醇=25:24:1），异戊醇的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。核酸非变性PAGE上样液小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。

核酸非变性PAGE上样液注意

1. 对大肠杆菌可从固体培养基上挑取单个菌落直接进行煮沸法提取质粒DNA。     

2. 煮沸法中添加溶菌酶有一定限度,浓度高时,细菌裂解效果反而不好。有时不同溶菌酶也能溶菌。      

3. 提取的质粒DNA 中会含有RNA,但RNA 并不干扰进一步实验,如限制性内切酶消化,亚克隆及连接反应等。

核酸非变性PAGE上样液其它产品信息：

小鼠溶质载体家族30成员5(SLC30A5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

小鼠溶质载体家族30成员6(SLC30A6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

大鼠肝细胞核因子1β(HNF1β)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

小鼠丙糖磷酸异构酶1(TPI1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

牛亚硫酸盐氧化酶(SUOX)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

小鼠墨蝶呤还原酶(SPR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

人亮氨酸丰富重复FLII相互作用蛋白1(LRRFIP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

人端粒保护1同源物(POT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

人含亮氨酸丰富重复蛋白3C(LRRC3C)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

小鼠FK506结合蛋白样蛋白(FKBPL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

人无翅型MMTV整合位点家族成员4(WNT4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

人含RCC1和BTB域蛋白2(RCBTB2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

人类固醇5α还原酶2(SRD5α2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

人含SET域蛋白7(SETD7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

人赫曼斯基普德拉克综合征蛋白6(HPS6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

人丝氨酸蛋白酶50(PRSS50)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

人含Toll白介素1受体域衔接蛋白(TIRAP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

人肌球蛋白重链7B(MYH7B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

人无翅型MMTV整合位点家族成员9B(WNT9B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

人T-框蛋白21(TBX21)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

人粘蛋白12(MUC12)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

大鼠钠/钾离子转运ATP酶β4肽(ATP1β4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

人棘皮动物微管关联蛋白样蛋白2(EML2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

人胎盘特异性蛋白9(PLAC9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)