RNase A溶液实验要点
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2.在最适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用苯酚和氯仿的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的异戊醇(苯酚—氯仿—异戊醇=25:24:1),异戊醇的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。RNase A溶液小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
RNase A溶液注意
1. 对大肠杆菌可从固体培养基上挑取单个菌落直接进行煮沸法提取质粒DNA。
2. 煮沸法中添加溶菌酶有一定限度,浓度高时,细菌裂解效果反而不好。有时不同溶菌酶也能溶菌。
3. 提取的质粒DNA 中会含有RNA,但RNA 并不干扰进一步实验,如限制性内切酶消化,亚克隆及连接反应等。
RNase A溶液其它产品信息:
雷公藤红素 A0106 Celastrol
雷公藤内酯甲 A0107 ?wilforlide A
木犀草素 A0108 Luteolin
木犀草苷 A0109 Cynaroside
没食子酸 A0110 Gallic acid
蒙花苷 A0111 Buddleoside
莽草酸 A0112 Shikimic acid
芹菜素 A0113 Apigenin
青藤碱 A0116 Sinomenine
齐墩果酸 A0117 Oleanolic acid
七叶皂苷钠 A0118 Sodium Aescinate
木糖醇 A0119 Xylitol
盐酸育亨宾 A0120 Yohimbine Hydrochloride
烟碱 A0121 Nicotine
金雀花碱(野靛碱) A0122 Cytisine
秋水仙碱 A0123 Colchicine
薯蓣皂苷元 A0124 Diosgenin
薯蓣皂苷 A0125 Dioscin
原薯蓣皂甙 A0126 Protodioscin
蛇床子素 A0127 Osthole
麝香酮 A0128 Muscone
山奈酚 A0129 Kaempferol
水杨苷 A0130 Salicin
水飞蓟宾 A0131 Silymarin
芸香柚皮苷 A0132 Narirutin
芍药苷 A0133 Paeoniflorin
鼠李糖 A0134 Rhamnose
甜菜碱 A0135 Betaine
盐酸甜菜碱 A0136 Betaine hydrochloride
甜菊苷 A0137 Stevioside
天麻素 A0138 Gastrodin
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