RNA上样缓冲液实验要点
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2.在最适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用苯酚和氯仿的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的异戊醇(苯酚—氯仿—异戊醇=25:24:1),异戊醇的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。RNA上样缓冲液小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
RNA上样缓冲液注意
1. 对大肠杆菌可从固体培养基上挑取单个菌落直接进行煮沸法提取质粒DNA。
2. 煮沸法中添加溶菌酶有一定限度,浓度高时,细菌裂解效果反而不好。有时不同溶菌酶也能溶菌。
3. 提取的质粒DNA 中会含有RNA,但RNA 并不干扰进一步实验,如限制性内切酶消化,亚克隆及连接反应等。
RNA上样缓冲液其它产品信息:
xy-E11325 人胎盘泌乳素(PL)ELISA试剂盒
xy-E11326 人雄激素结合蛋白(ABP)ELISA试剂盒
xy-E11327 人抗滋养膜细胞抗体(ATA)ELISA试剂盒
xy-E11328 人抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒
xy-E11329 人抗卵巢抗体(AOAb)ELISA试剂盒
xy-E11330 人抗巨细胞病毒抗体IgG(anti-CMV IgG)ELISA试剂盒
xy-E11331 人碱性胎儿蛋白(BFP)ELISA试剂盒
xy-E11332 人抗风疹病毒IgM抗体(anti-RV IgM)ELISA试剂盒
xy-E11333 人催产素(OT)ELISA试剂盒
xy-E11334 人妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)ELISA试剂盒
xy-E11335 人抗子宫内膜抗体(EMAb)ELISA试剂盒
xy-E11336 人抗精子抗体(AsAb)ELISA试剂盒
xy-E11337 人妊娠疱疹抗体(HG)ELISA试剂盒
xy-E11338 人胎盘生长因子(PLGF)ELISA试剂盒
xy-E11339 小鼠FMS样酪氨酸激酶3配体(Flt3L)ELISA试剂盒
xy-E11317 人胎儿血红蛋白(HBF)ELISA试剂盒
xy-E11318 人抗巨细胞病毒抗体IgM(anti-CMV IgM)ELISA试剂盒
xy-E11319 人抗弓形体IgM抗体(anti-tox IgM)ELISA试剂盒
xy-E11320 人抗风疹病毒IgG抗体(anti-RV IgG)ELISA试剂盒
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xy-E11322 人孕酮受体(PGR)ELISA试剂盒
xy-E11323 人新生儿促甲状腺素(N-TSH)ELISA试剂盒
xy-E11324 人妊娠特异性β1糖蛋白(SP1/PSβ1-G)ELISA试剂盒
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