半固体琼脂

用途：半固体琼脂用于分子生物学中的培养
原理：蛋白胨提供碳源和氮源；葡萄糖提供能源；琼脂是培养基的凝固剂。
用法：称取本品65.0g,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中121℃高压灭菌15分钟,冷却至50℃左右时,加入过滤除菌的氯霉素50mg,混匀,倾入无菌平皿。
【注意事项】：由于液体培养基不易长期保管，现在均改制成粉末。

培养基有天然、人工两种半固体琼脂一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基，以双蒸或三蒸水配制。NaHCO3（或HCl）调pH至7.2～7.4，若pH值超过7.6或远低于6.8，则大多数细胞不能生长。RPMI-1640不耐高压灭菌，使用前需经灭菌0.22μm孔径滤膜滤过处理。

半固体琼脂的保存
1）干粉，买了后一定要保存在4度。有人保存在-20度我认为没有必要。但4度是非常必要的。保证期是有提示的。
2）配好的无血清培养基一定保存在4度，保存不要超过3个月。用时根据提示要加入谷胺酰胺。
3）加入血清的培养基，最好保存在4度不要超过1个月，从时间太长，活性下降。当然稍微长点也不一定出问题。但是根据细胞而定;如果原代培养，最好新鲜，如果是肿瘤细胞，或仅维持传代就不太要紧。但是原则是越新越好。
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