ELISA 技术的操作要点
ELISA试剂盒样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存大鼠颗粒酶B(Gzms-B)ELISA试剂盒于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
血清标本可按常规方法采集,应留意避免溶血,红细胞溶解时会开释出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP 为标记的ELISA 测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。ELISA的操纵因固相载体的形成不同而有所差异,海内医学检修一般均用板式点。
标本的采取和保留
可用作ELISA测定的标本十分广泛,体液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。大鼠颗粒酶B(Gzms-B)ELISA试剂盒反复冻融会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保留作多次检测,宜少量分装冰存。一般说来,在5天内测定的血清标本可放置于4℃,超过一周测定的需低温冰存。如在冰箱中保留过久,其中的可发生聚合,在间接法ELISA 中可使本底加深。保留血清自采集时就应留意无菌操纵,也可加入适当防腐剂。除特殊情况外,在医学检修中均以血清作为检测标本。本文将叙述板式ELISA各个操纵步骤的留意要点,珠式、管式及磁性球ELISA,进口ELISA试剂盒均与特殊仪器配合应用,两者均有具体的使用说明,严格遵照划定操纵,必能得出正确的结果。
优质的试剂,良好的仪器和准确的操纵是保证ELISA试剂盒检测结果正确可靠的必要前提。血清标本宜在新鲜时检测。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外,其他成份均同即是血清。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP ,也会产生假阳性反应。有些标本可直接进行测定(如血清大鼠颗粒酶B(Gzms-B)ELISA试剂盒、尿液),有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物)。制备血浆标本需借助于抗凝剂,而血清标本只要待血清天然凝固、血块收缩后即可取得。大部门ELISA检测均以血清为标本。在ELISA中血浆和血清可平等应用。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下倒置混和,不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。
大鼠颗粒酶B(Gzms-B)ELISA试剂盒公司其它热销试剂盒:
hz-E12504 大鼠热休克蛋白70(HSP-70)ELISA试剂盒 Rat heat shock protein 70,hSP-70 ELISAkit
hz-E12505 大鼠热休克蛋白40(HSP-40)ELISA试剂盒 Rat heat shock protein 40,hSP-40 ELISAkit
hz-E12506 大鼠热休克蛋白20(HSP-20)ELISA试剂盒 Rat heat shock protein 20,hSP-20 ELISAkit
hz-E12507 大鼠β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA试剂盒 Rat amyloid beta peptide 1-40,Aβ1-40 ELISAkit
hz-E12508 大鼠细胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA试剂盒 Rat Cyclin-D3 ELISAkit
hz-E12509 大鼠细胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA试剂盒 Rat Cyclin-D2 ELISAkit
hz-E12510 大鼠细胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA试剂盒 Rat Cyclin-D1 ELISAkit
hz-E12511 大鼠髓磷脂碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒 Rat myelin basic protein,MBP ELISAkit
hz-E12512 大鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒 Rat Alpha-fetoprotein,AFP ELISAkit
hz-E12513 大鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA试剂盒 Rat Prostatic Acid Phosphatase,PAP ELISAkit
hz-E12514 大鼠游离前列腺特异性抗原(fPSA)ELISA试剂盒 Rat Free Prostate Specific Antigen,fPSA ELISAkit
hz-E12515 大鼠前列腺特异性抗原(PSA)ELISA试剂盒 Rat prostate specific antigen,PSA ELISAkit
hz-E12516 大鼠卵巢癌标志物CA125ELISA试剂盒 Rat ovarian cancer marker-CA125 ELISAkit
hz-E12517 大鼠乳腺癌标志物-CA153ELISA试剂盒 Rat mammary carcinoma Marker-CA153 ELISAkit
hz-E12518 大鼠胃肠癌标志物CA199ELISA试剂盒 Rat Gastrointestinalcancer Marker-CA199 ELISAkit
hz-E12519 大鼠血红素氧合酶1(HO-1)ELISA试剂盒 Rat heme oxygenase 1,HO-1 ELISAkit
hz-E12520 大鼠磷脂酶A2(PL-A2)ELISA试剂盒 Rat Phospholipidase A2,PL-A2 ELISAkit
hz-E12521 大鼠组织因子途径抑制物(TFPI)ELISA试剂盒 Rat Tissue factor pathway inhibitor,TFPI ELISAkit
hz-E12522 大鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA试剂盒 Rat Aquaporin 5,AQP-5 ELISAkit
hz-E12523 大鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA试剂盒 Rat Aquaporin 4,AQP-4 ELISAkit
hz-E12524 大鼠水通道蛋白3(AQP-3)ELISA试剂盒 Rat Aquaporin 3,AQP-3 ELISAkit