一、产品用途:
本产品可选择性吸附样品提取液中的黄曲霉毒素,从而对样品液中的黄曲霉毒素(B1,B2,G1,G2)起到非常针对性的纯化作用,过柱纯化后的样品液纯度被提高,可用于不同分析方法的测定。
二、产品概述:
黄曲霉毒素(Aflatoxin)是黄曲霉、寄生曲霉等真菌产生的次级代谢产物,被世界卫生组织癌症研究机构划分为1类致癌物,同时又是一种毒性极强的剧毒物质。广泛存在于各种食物中,如玉米、花生、大米和小麦等谷物及其副产品。饲料中的黄曲霉毒素B1经过动物代谢后产生的黄曲霉毒素M1仍然具有很强的毒性和致癌性,广泛存在于牛奶、血液、组织等食品中。黄曲霉毒素作为肝癌的三大诱因之一,也是胃癌,肠癌等疾病的主要原因,对人类的健康构成很大威胁。世界各国对食品和饲料中的黄曲霉毒素都有严格的限量标准。
三、反应原理:
本产品测定的基础是抗原抗体反应。黄曲霉毒素抗体固定于柱内凝胶上,样品中的黄曲霉毒素经过提取、过滤、稀释,然后缓慢通过黄曲霉毒素免疫亲和柱,在柱内黄曲霉毒素与抗体特异性结合,之后洗涤免疫亲和柱,除去未结合的其他物质。用甲醇洗脱黄曲霉毒素,注入到分析仪器中进行检测。
四、产品包装组成:
每盒中包含25支黄曲霉毒素总量免疫亲和柱及1套相应说明书。
五、IAC性能:
1、性能参数
柱容量 | ≥200ng |
黄曲霉毒素(回收率) | >90% ±5% |
2、交叉反应率
黄曲霉毒素B1 | 100% | 黄曲霉毒素G1 | 101% |
黄曲霉毒素B2 | 86% | 黄曲霉毒素G2 | 83% |
六、注意事项:
1、黄曲霉毒素对人体有害,应戴手套操作。
2、使用过的玻璃容器及黄曲霉毒素溶液最好用5%
浓度的次氯酸钠溶液浸泡过夜。
3、不要使用过了有效日期的免疫亲和柱。
4、免疫亲和柱不使用时要2-8℃保存,不可冻存。
5、使用前,免疫亲和柱需回至室温(22-25℃)。
6、取样量:根据实际情况可以适当增减,但不可太少,同时提取液体积要按比例随之改变。
7、pH:上柱液pH要在6~8之间,若偏离此范围需用盐酸或氢氧化钠调节pH。
七、需要的材料但盒中不提供:
设备 | 器皿耗材 | 试剂 |
HPLC 泵流操作架 高速均质器高速粉碎机 | 量筒(50/200mL) 漏斗 收集瓶 容量瓶(100mL/1L) 微量移液器:单道 定量滤纸 玻璃微纤维滤纸 离心管(50mL) | 色谱级甲醇 蒸馏水 AFT标准品 |
八、试剂配制:
1、提取液:甲醇-水(7:3)
移取700mL甲醇,加蒸馏水300mL混合。
九、样品处理:真菌毒素分析的最大误差来源是样品的收集和取样过程,所以要保证样品收集和取样的代表性。
(一)花生、大米、玉米、小麦及其制品,植物油
脂和饲料
1、称取25g粉碎的样品(植物油脂直接取样)移至均质器中,再称取5g氯化钠加入均质器中;
2、加125mL甲醇-水(7:3)溶液高速均质2min;
3、4000r/min离心5min或用滤纸过滤;
4、取10mL滤液并加入30mL蒸馏水稀释;
5、用玻璃微纤维滤纸过滤,取过滤后液体待用;
(二)酱油
1、称取50g样品与2.5g氯化钠加入均质器中;
2、加100mL甲醇-水(7:3)溶液高速均质2min;
3、4000r/min离心5min或用滤纸过滤;
4、取10mL滤液并加入40mL蒸馏水稀释;
5、用玻璃微纤维滤纸过滤, 取过滤后液体待用;
(三)食醋
1、称取5g样品于25mL容量瓶中,加1.0g氯化钠,用pH7.0磷酸盐缓冲溶液稀释定容至25.0mL;
2、4000r/min离心5min或用滤纸过滤;
3、取10mL滤液并加入10mL蒸馏水稀释;
4、用玻璃微纤维滤纸过滤, 取过滤后液体待用;
注意:pH7.0磷酸盐缓冲溶液:称取8g氯化钠,1.2g磷酸氢二钠,0.2g磷酸二氢钾,0.2g氯化钾,用990mL蒸馏水溶解,然后用浓盐酸调节pH值至7.0,最后用蒸馏水稀释定容至1000mL。
十、操作程序:符合GB/T 18979-2003国标方法
1、连接:将免疫亲和柱后盖取下,用剪刀剪开,重新盖上,连接于泵流操作架的30mL注射器下;
2、上样:准确移取10mL样品提取液转移至注射器内,打开下端堵头;
3、富集:将空气压力泵与注射器连接,调节压力使样品提取液缓慢通过免疫亲和柱,建议重力过柱;
4、洗涤:用20mL蒸馏水分两次加压清洗,弃去全部流出液,并使2-3mL空气通过柱体;
5、洗脱: 为保证洗脱充分,建议以2.0mL色谱级甲醇分两步进行洗脱,重力洗脱即可。首先,将免疫亲和柱内液体排干,下端盖上堵头,加1.0mL甲醇于柱管内孵育60秒以上(孵育即甲醇在柱子中浸泡),重力过柱,当溶剂通过柱子后;再加入1.0mL甲醇重复上述洗脱步骤,最后轻微加压排净洗脱液,合并洗脱液供检测用。
十一、操作流程图示
![tttttttt.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/201707/uepic/0330af92-37ed-4547-8794-48a7260ee7a4.jpg)
产品信息:
产品名称: | PriboFast®黄曲霉素总量免疫亲和柱 |
产品货号: | PriboFast® IAC-011-3 |
产品描述: | 黄曲霉毒素单克隆抗体 |
包装单位: | 25支/盒 |
储存条件: | 2~8℃,切勿冷冻 |
保质期: | 18个月 |
本公司可提供的真菌毒素检测产品
类型 | 产品名称 |
ELISA酶联 免疫试剂盒 | 黄曲霉毒素总量(AFT) |
黄曲霉毒素B1(AFB1) |
黄曲霉毒素M1(AFM1) |
呕吐毒素(DON) |
玉米赤霉烯酮(ZON) |
伏马毒素(FUM) |
T-2毒素(T-2) |
免疫亲和柱 | 黄曲霉毒素总量(AFT) |
黄曲霉毒素B1(AFB1) |
黄曲霉毒素M1(AFM1) |
呕吐毒素(DON) |
玉米赤霉烯酮(ZON) |
伏马毒素(FUM) |
T-2毒素(T-2) |
赭曲霉毒素(OTA) |
真菌毒素六合一免疫亲和柱 |
可定制多毒素复合免疫亲和柱 |
多功能净化柱 | MFC220(Don+Niv) |
MFC221(FUMB1+B2+B3) |
MFC226(Aft+Zon) |
MFC227(Aft+T-2) |
MFC228(Aft+Pat) |
MFC229(Och A+B) |
胶体金快速 检测卡 | 黄曲霉毒素B1(AFB1) |
黄曲霉毒素M1(AFM1) |
呕吐毒素(DON) |
玉米赤霉烯酮(ZON) |
三聚氰胺 |
注:本公司提供毒素固体液体标准品及质控样品