2005版《中国药典》采用HPLC法测定了人参皂苷Rb3的含量,色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。以乙腈为流动相A,以0。2%磷酸溶液为流动相B,按下式进行梯度洗脱,检测波长为203nm。...
0~19分钟:流动相A(%):30→35;流动相B(%):70→65
19~21分钟:流动相A(%):35→60;流动相B(%):65→40
21~26分钟:流动相A(%):50;流动相B(%):50
做出来的图谱如下
图一:人参皂苷Rb3 图二:供试品
请问该如何调整流动相比例或者采用什么办法使其出峰提前,而不至于出现在坡形上???
![](http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/200781716947_01_0_3.jpg)
![](http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/200781716101_01_0_3.jpg)
非常感谢大家的热心帮助,综合了大家的参考意见,并经过几次流动相比例的摸索调整,出峰时间已经提前了,但还是出现了连峰分离度不好的情况,请大家再看看在这段出峰时间如何再调整比例,使峰分离得更好,谢谢!!!
0~10分钟:流动相A(%):30→35;流动相B(%):70→65
10~21分钟:流动相A(%):35→50;流动相B(%):65→50
21~26分钟:流动相A(%):50;流动相B(%):50
![](http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2007109105941_01_0_3.jpg)
![](http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2007109105956_01_0_3.jpg)