因为接触液相全靠文献，不太懂一些hplc的细节。
跑了好久的hplc，用的是安捷伦1260 infinitlly ②
流动相：5mM醋酸铵；甲醇
检测器：400nmVWD（因为VWD检测器样品一直没有信号，所以就串联了FLD检测器）
色谱柱：C18反相色谱柱125*4mm， 5um
标品：因为极性小，用了DMSO溶解
样品：酶液中提取，提取剂为酸性丙酮；乙醇DMSO冰醋酸；（两种提取方法均来自于文献）
目前拿这个样品跑过upLCMSms，样品中肯定含有PPIX。
问题：为什么标品能正常出峰而样品只能出heme的峰，没有PPIX的峰？是前处理的问题吗？过膜会截留PPIX嘛？又或者是其他问题？在这里寻求各位的帮助！谢谢了！