我的样品首先经过大孔树脂HP20粗分，然后再用LH20纯化，75%甲醇洗脱流速1ml/min，但是再洗柱子，逐步将洗脱液换成50%甲醇、25%甲醇、水、NaOH-NaCl溶液，发现在恒流泵转速一定的情况下，流速越来越慢，25%甲醇过渡的时候只有0.5ml/min不到，是不是LH20走水相的流速会很慢吗？还是因为洗脱液里面有杂质，导致柱子堵住了？恳请大家的帮助，这个问题困扰我太长时间了，查找了相关资料也没有解决，之前这样洗柱子还可以，但是现在流速越来越慢，感觉太影响实验速度了。