最近在跟一个项目，大概四五步的合成实验，只有第一步有原料，中间各步没有标品，只有合成人员自己合成的东西，第一步时开发了一个方法原料和产物峰能分开，到第二步还用的第一步的方法，问题来了，反应中控了一天一个产物的峰都没有生成，而且由于这步用了DMF还是210nm的波长，有很大的溶剂峰，上一步的产物也就是这步的原料反倒不出峰了，而且感觉没有新的东西生成，后来换了波长254，结果同样的样品出峰数不一样了，而且加大了水相比例发现同样的样品出峰数也不一样了，现在不知道到底哪个方法下测的中控才对。。。。由于后面还会遇到这个问题，所以赶紧来请教请教大家，没有各步中间体的情况下，怎么确定方法的正确性