所有提问
色谱 | 光谱 | 质谱 | 波谱 | 显微镜 | 物性测试 | 样品前处理 | 常用设备 | 食品检测 | 药物分析 | 环境监测 | 实验室建设/管理 | 认证认可 | 基础知识    更多>>
未解决的问题:146751
所有仪器问答:170711
 您现在的位置:首页 > 仪器问答 > 色谱 > 凝胶色谱凝胶色谱论坛
共有 1 人回复了该问答请教各位大侠凝胶色谱中流动相加盐的目的和原理
 回复dlleap发表于:2020/9/5 16:10:39悬赏金额:1积分 状态:未解决
本人凝胶色谱新手,在做一个项目,需要用凝胶色谱。美国药典论坛上已有方法,重复了人家方法发现有些地方不对,撇开这些不谈,先说说我的疑问吧!
1 美国药典上的流动相加了0.1M的硝酸钾,我试了一针加的,一针不加的,发现不加盐峰会前沿,加盐的峰很对称,请问在凝胶色谱里加盐的目的除了改善峰形还有什么作用吗?我更好奇的是盐是通过什么原理来改善峰形的?
2 还有一个很奇怪的现象,我的样品和两个杂质出峰时间重叠,即专属性不合格,这三种物质虽然都是钠盐,但大家请注意样品的分子量范围是1000-2000,而两个杂质的分子量一个是100多,一个是300多,就是说在分离原理为分子排阻的凝胶色谱里,分子量1000多的和100,300的一起出峰,改变流动相(换过纯水,也试过加大有机相比例)变化并不明显,这是为什么呢?难道现在的凝胶色谱已经不是单纯的分子排阻原理了,还是说样品的出峰时间除了和分子量有关,还和他们的水溶性有关?
这两个问题快把我折磨疯了,请高手解答!
 回复  1# doxw0323  回复于:2020-09-06 12:37:39
你说对了,你是水相,不加盐凝胶色谱已经不是单纯的分子排阻原理,在做水相时一定要加盐,加盐的目的是消除高分子物质在柱子中的其他作用,比如化学键作用,离子效应吸附等影响。加有机溶剂能达到一定的效果,也不全能解决,水相柱子能承受的有机比率也有极限,另还有pH值的影响,你目标物是否带电荷等等因素。
扫一扫查看全部1条回复
高级回复快速回复【花三五分钟,帮别人解决一个问题,快乐自己一天!】