请教大伙一个问题，关于SPE C18脱盐
我的样品是小鼠肝全蛋白，经过胰酶酶切和定量标记后想在上液质前脱盐。用的是waters的Sep Pak C18脱盐柱，样品和填料比为1:1000。
流程如下：
活化：1、1mL 100%乙腈
          2、1mL 50%乙腈/50%水
平衡：0.1% FA，10倍柱体积
上样：样品用FA调至3~4，加入萃取柱中，使其按重力自然流出
清洗：1mL 0.1% FA，洗盐
洗脱：1mL 洗脱液（50%乙腈，0.1% FA），静置2min后，洗脱样品
回收穿过液，清洗液和洗脱液测肽段浓度，用的是thermo家的肽段定量试剂盒。回收效率只有60~70%。请问该如何改进流程？