最近在用磷酸盐缓冲液测定5’-nucleotides时遇到了一个问题，希望大家能帮忙解决一下：
第一天，测定结束后（峰形正常，压力稳定），用20%甲醇溶液清洗2h， 流速0.5ml/min,之后用100%甲醇清洗灌柱30min,1ml/min (压力稳定)。
第二天测定前用20%甲醇过渡，在洗了几分钟后压力开始上升并超过上限3000psi。
purge阀打开，流动相冲洗，压力为40psi；purge阀关闭，20%甲醇，流速0.1ml/min在五分钟内压力一直上升最后超过上限。且色谱柱入口没有溶液流出。
请问这是什么原因，应该怎么解决？拜托。