样品的浓度增加可能会导致峰的形状变化，包括出现大包。如果样品的浓度比以前高，可能会导致样品在柱子上的负载过重，从而影响分离效果。样品的纯度降低或存在杂质可能会导致峰的形状变化。杂质的存在可能会干扰目标物质的分离，导致峰的形状不规则。流动相的稳定性对色谱分离至关重要。如果流动相的组成、pH值、离子强度等发生变化，可能会导致峰的形状变化。例如，盐的浓度变化可能会导致离子强度的变化，从而影响分离效果。
色谱柱的使用状态也会影响分离效果。如果色谱柱的填料受到污染或老化，可能会导致峰的形状变化。此外，色谱柱的温度、压力等条件的变化也会影响分离效果。