我是用望尔的试剂盒检测组织的四环素的，但是在前处理样品加入8ml柠檬酸缓冲液后就出现问题了，因为没有10°C的离心机，所以我就把放入样品的离心管放在冰水中降温（一般是泡大概20分钟左右），在这一步中我不能确定样品是否已经降到了10°C，然后就进行离心，离心之后我觉得上层的液体不怎么清亮，就把上层的液体进行过滤，可是过滤后的样液不足5ml，然后按照接下的步骤做下来，最后检测系统有时候分析出来的结果会写着“超出范围”没有数据出来。
  我想问的是：1.在上面的操作中我用冰水降温这样做行吗？
                      2.离心后的样液还要过滤吗？如果要过滤的话为什么每次我过滤后的样液都不足5ml呢？